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秋石斛组织培养研究
秋石斛组织培养研究
摘要:秋石斛为兰科植物,具有较高的观赏价值。本试验旨在建立秋石斛的工厂化育苗模式。采用秋石斛的高位芽为外植体,用75%酒精消毒1min后,再用0.1%HgCl2消毒20min,达到最佳的消毒效果。试验发现最佳的不定芽诱导培养基为MS+6-BA1.0mg?L1+IBA0.5mg?L1+土豆泥80g?L1+活性炭1g?L1,增殖系数为4.5。最佳的生根壮苗培养基为MS+IBA0.8mg?L1+土豆泥80g?L1+活性炭1g?L1,生根率99%。移栽成活率达到95%。
关键词:秋石斛;组织培养;不定芽诱导;生根培养
中图分类号:S723.1+32.6文献标识码:A文章编号:1004-3020(2015)03-0020-03
TissueCultureTechniqueofDendrobiumhybrida
ZhangJuan
(FujianResearchInstituteofForestryFuzhou350012)
Abstract:DendrobiumhybridabelongstofamilyOrchidaceaewithhighornamentalvalue.WeestablishedamassproductionmethodforD.hybrida.Takinghighpositionbudsastheexplants,theoptimaldisinfectiontreatmentwas75%alcoholfor1minuteandthen0.1%HgCl2for20minutes.TheresultsshowedtheoptimalmediumforproliferationofadventitiousbudwastheMSmediumsupplementedwith1mg?L16-BA,0.5mg?L1IBA,100mg?L1mashedpotatoand1mg?L-1activatedcharcoal(AC),providingaproliferationcoefficientof4.5.TheoptimalmediumforrootingwasMSmediumsupplementedwith0.8mg?L1IBA,100mg?L1mashedPotatoand1mg?L1AC,providing99%rootingrateand95%survivalrate.
Keywords:Dendrobiumhybrida;tissueculture;inductionofadventitiousbud;rootingculture
秋石斛Dendrobiumhybrida为兰科石斛属,主要分布在我国西南、华南、台湾等热带、亚热带和秦岭以南地区,喜高温、湿润环境。秋石斛每年秋季开花,花色多,花量多,而且花期可长达两个月,具有非常高的观赏价值,又由于其花形类似蝴蝶,故称蝴蝶石斛[1],作为一种新型的切花品种,常用于餐盘布置、插花等,近年来市场需求量很大[2]。目前秋石斛的主要繁殖方式为分株和高芽繁殖[3],繁殖系数低,推广局限性大。本试验对秋石斛外植体消毒、增殖培养、生根培养等进行研究,以期为大规模的组培苗生产提供了技术支撑。
1材料和方法
1.1材料
本试验以秋石斛品种“阳光”的高位芽为外植体,秋石斛材料由鑫闽种业有限公司提供。
1.2方法
1.2.1外植体的消毒
于2012年3月中旬,将生长状况良好的植株上萌发的高位芽取下,剥去外层叶片,剪去根和顶部叶片,用饱和洗衣粉溶液浸泡30min后,清水冲洗干净。在超净工作台中进行消毒处理,先用75%酒精消毒,再用0.1%Hgcl2浸泡,最后用无菌水冲洗5次,消毒处理见表1。
经过消毒处理的材料接种于MS+6BA2.0mg?L1+NAA0.5mg?L1+胰蛋白胨2g?L1的外植体培养基。每瓶接种一个茎段,试验重复3次。
1.2.2不定芽的增殖
经过初代培养的材料接种在继代培养基中,用于诱导不定芽。比较不同种类和不同用量的添加物,对秋石斛不定芽增殖的影响。每瓶培养基中接种5个茎段,每个处理20瓶,试验重复3次。接种50d后,观察苗木生长情况,统计增殖率。继代培养基:①MS+6BA1.0mg?L1+IBA0.5mg?L1+蛋白胨2g?L1;②MS+6BA1.0mg?L1+IBA0.5mg?L1+花宝一号2g?L1;③MS+6BA1.0mg?L1+IBA0.5mg?L1+土豆泥80g?L1;④MS+6BA1.0mg?L1+IBA0.5mg?L1+香蕉泥80g?L1;⑤MS+6BA1.0mg?L1+IBA0.5mg?L1+土豆泥80g?L1+活性炭1g?L1。
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