罗氏Cobas e601全自动免疫分析仪检测人附睾蛋白4性能验证.docVIP

罗氏Cobas e601全自动免疫分析仪检测人附睾蛋白4性能验证 　　摘要：目的 验证和评价罗氏Cobas e601全自动免疫分析仪检测系统人附睾蛋白4项目的分析性能。方法 参考美国临床实验室标准化协会（CLSI）系列文件和相关文献，对罗氏Cobas e601电化学发光免疫检测系统测定血清人附睾蛋白4（HE4）的精密度、准确度、分析灵敏度、分析测量范围、生物参考区间5大分析性能进行验证和评价，并将实验结果与厂商声明的性能或公认的质量标准进行比较。结果 测定均值为100.66pmol/L的质控样本，验证后S批内为0.827 ，S总为1.679；测定均值为1296.60pmol/L的质控样本，验证后S批内为6.077，S总为5.596 。S批内≤1/4TEa，S总≤1/3TEa（CLIA88）。准确度在±1%以内，低于卫生部允许的偏差范围；分析灵敏度5 pmol/L；线性范围为60.65pmol/L～1364.50 pmol/L；生物参考区间在0.00pmol/L～104.00 pmol/L， 均与厂商提供的参数接近。结论 罗氏Cobas e601电化学发光检??HE4的主要分析性能均与厂商声明一致。本系统检测性能符合CAP要求。 　　关键词：全自动免疫分析仪；性能验证；人附睾蛋白4 　　为规范医学实验室工作，提高检验质量，美国临床实验室标准化协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）于2003年颁布了《医学实验室质量和能力的专用要求》（ISO15189）作为医学实验室认可的标准，该标准要求申请认可的实验室应对设备、检测系统或方法的主要分析性能进行验证或确认，证实其能够达到所要求的性能标准。按照ISO15189，以及美国颁布的《临床实验室修正法案》（Clinical Laboratory Improvement Amendments 88，CLIA88）、美国病理家学会（College of Ameriean Pathologists ，CAP）的认证标准，在开展某一检测项目前，需提供并保留相关的方法学验证实验数据。我国2006年颁布的《医疗机构临床实验室管理办法》要求，对未开展室间质评的检验项目，临床实验室必须对检测系统的分析性能进行评价，才可将分析系统用于常规工作。但如何合理选择、系统设计定量检验项目方法学性能验证方案和实验方法，国内报道甚少。我们参照CLSI指南文件，探讨临床电化学发光免疫法测定血清人附睾蛋白4的方法学性能验证方案和实验方法。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 本院2013年3月门诊体检者新鲜血清（样本无溶血、无黄疸、无脂血），混合后分装冷冻保存。 　　1.2 仪器与试剂 德国Roche公司Cobas 6000全自动生化免疫分析模组中e601全自动免疫检测模块。所用试剂为仪器原装配套试剂盒、标准品及质控品。 　　1.3 方法 按照标准操作程序对仪器进行常规保养和维护，每天进行常规质控（2个浓度水平），质控在控后进行验证试验。 　　1.3.1 精密度验证 参考美国临床和实验室标准组织（CLSI）EP5-A2文件，选取2个水平的质控血清作为批内和批间精密度的待测标本，连续检测20次，对HE4的精密度进行验证。通过实验得到估计的批内标准差（S批内）和总的标准差（S总）。并与厂家声明的不精密度进行比较。根据CLIA88要求，批内精密度应≤1/4TEa，总精密度应≤1/3TEa。验证值得计算方法如下： 　　批内精密度估计值的计算 　　求出均值： x=∑Xi/n 　　使用下列公式计算出批内标准差估计值的标准差 　　Sr=■ 　　1.3.2 准确度验证验证 参考CLSI EP5-A2文件，先用HE4校准品（Lot：168118浓度分别为：4.1pmol/L、196.0pmol/L）对检测系统进行校准；再用校准品进行检测，对各自检测结果与靶值进行比对，计算检测值与靶值的相对偏倚，计算公式：Bias=（测定值-靶值）/×靶值% 　　1.3.3 分析灵敏度验证 用去离子水作为零校准品连续测定20次，取其平均值，以 x±2s为检测项目的灵敏度。 　　1.3.4 分析测量范围验证 参考CLSI EP6-A3文件，分别收集HE4浓度接近厂商声明的线性范围下限和上限的低值样本（L）和高值样本（H），按L、0.75L+0.25H、0.5L+0.5H、0.25L+0.75H、H混合，配制成系列浓度实验样本，每个浓度重复测量2次。在重复测量误差符合实验要求的条件下，数据在SPSS13.0软件上进行多项式回归分析，判断实验所涉及的浓度范围内是否为线性。当实验数据为非线性时，计算线性偏离。若每个浓度点的线性偏离小于线性允许误差，则实验所涉及的浓度