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罗田甜柿总三萜提取条件分析 　　摘要：为了确定罗田甜柿（Diospyros kaki Thunb.）成熟果实中总三萜含量和提取条件，以湖北省罗田县的罗田甜柿果实为试材，从不同的溶剂、乙醇体积分数、提取时间、温度、料液比、提取次数来确定提取罗田甜柿成熟果实中总三萜的最佳条件，结果表明，通过单因素试验确定提取条件为70%乙醇作为溶剂，提取时间3 h，温度85 ℃，料液比1∶11（m∶V，g∶mL），提取2次，总三萜提取量最高可达51.13 mg/100 g（FW）。 　　关键词：罗田甜柿（Diospyros kaki Thunb.）；总三萜；提取条件 　　中图分类号：S665.2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）13-3443-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.13.043 　　罗田甜柿（Diospyros kaki Thunb.）是指在大别山地区生长的，不需要经过人工脱涩就能够直接食用的一种甜柿，因为最先在罗田县发现，故而命名为罗田甜柿[1，2]。目前，该产品己申请国家地理标志。罗田甜柿果实成熟后呈橙黄色，果面极具光泽，气味清香诱人。果实中富含丰富的营养物质，如葡萄糖、果糖、蔗糖、花白甙、维生素、瓜氨酸等。每100 g甜柿鲜果肉的蛋白质含量为0.57～0.67 g、可溶性糖为11.68 g、脂肪为0.28～0.30 g，并且富含β-胡萝卜素、尼克酸、铁、锌、硒等多种微量元素和维生素B1、维生素B2、维生素E等[1]。三萜类化合物在菌类、蕨类、单子叶植物、双子叶植物、动物以及海洋生物中广泛存在，具有抗菌消炎、抑制肿瘤细胞生长、免疫调节等多种生理活性。本试验以湖北省罗田县的罗田甜柿果实为材料，分析了其果实中三萜类物质的提取条件，以期达到提高柿中三萜类物质的提取效率，将资源优势转化为经济优势。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　于2014年10月在罗田县三里畈镇摘取己成熟的新鲜罗田甜柿果实。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 材料处理 将采摘的果实带回实验室后，去除果蒂后洗净，自然晾干后切成块状并去掉种子，称重后，于烘箱中在80 ℃下烘干至恒重，计算干物质百分含量，粉碎后用于三萜类物质的提取。 　　1.2.2 提取条件单因素试验 　　1）提取溶剂的种类：准确称取4份甜柿粉碎物各10.00 g，分别加入11倍体积（甜柿∶提取溶剂=1∶11，m∶V，g∶mL，下同）的60%正己烷、85%乙醚、70%乙醇、80%甲醇，在85 ℃下水浴回流提取3 h，提取2次。 　　2）乙醇的体积分数：准确称取5份甜柿粉碎物各10.00 g，分别加入11倍体积的60%、70%、80%、90%、100%乙醇，在85 ℃下水浴回流提取3 h，提取2次。 　　3）提取时间：准确称取5份甜柿粉碎物各10.00 g，加入11倍体积的70%乙醇，分别在85 ℃水浴回流提取 2、3、4、5、6 h，提取2次。 　　4）提取温度：准确称取4份甜柿粉碎物各10.00 g，加入11倍体积的70%乙醇，分别在65、75、85、95 ℃下水浴回流提取3 h，提取2次。 　　5）料液比：准确称取5份甜柿粉碎物各10.00 g，分别加入不同体积的70%乙醇，料液比（g∶mL，下同）为1∶9、1∶11、1∶13、1∶15、1∶17，置于85 ℃下水浴回流提取3 h，提取2次。 　　6）提取次数：准确称取5份甜柿粉碎物，每份10.00 g，分别加入11倍体积的70%乙醇，置于85 ℃水浴下回流提取3 h，过滤后，在滤渣中再次加入11倍体积的70%乙醇，重复上述操作，合并滤液后，经旋转蒸发，减压浓缩，浓缩液定容后，以齐墩果酸为标准品，采用紫外分光光度法，在560 nm波长下测定其吸光度，确定总三萜类的含量，共提取5次。 　　所有提取液分别过滤后经旋转蒸发，减压浓缩，浓缩液定容后，以齐墩果酸为标准品，采用紫外分光光度法，在560 nm波长下测定其吸光度，确定总三萜类的提取量[3，4]。 　　2 结果与分析 　　2.1 提取溶剂种类的确定 　　由图1可知，甲醇、乙醇等极性较强的溶剂提取效果优于极性弱的溶剂乙醚或正己烷，其总三萜提取量分别为43.13、45.36、30.43、13.25 mg/100 g（FW）。因此，以70%乙醇的提取效果最佳。 　　2.2 提取溶剂乙醇体积分数的确定 　　不同体积分数乙醇提取甜柿中总三萜的结果如图2所示。乙醇体积分数从60%上升至70%的过程中，总三萜提取量随着提取液体积分数的升高而升高，分别为38.96、50.09 mg/100 g（FW）；随后继续升高乙醇体积分数至80%、90%、100%，总三萜提取量随之下降，分别为