纳米通道电化学单分子分析检测酶分子思考.docVIP

纳米通道电化学单分子分析检测酶分子思考 　　【摘要】目的：分析研究纳米通道电化学单分子分析检测酶分子的应用价值。方法：通过利用溶血素以及卵磷脂的自由组装形成生物纳米孔到，通过溶血素孔径的特性来控制单链DNA以及双链DNA通过孔径的时候不同电流下降，对凝血酶与是凝血酶试题的亲和作用给予分析研究。结果：因为颈环结构属于双链结构无法穿过溶血素纳米孔道卡在溶血素孔道当中，造成电流信号终止。结论：颈环结构可以在高电压下被伸展开，可以顺利通过纳米通道。另外，颈环结构DNA解链时间和双链序列没有关系，和施加电压有密切关系。凝血酶作用以后的dsDNA可以顺利通过溶血素纳米孔道能够看见凝血酶，与凝血酶适体有非常高的亲和力，可以将凝血酶适体从dsDNA当中脱离开。 　　【关键词】纳米通道；电化学单分子；酶分子 　　Abstract：Objective： To study the application value of the detection of the enzyme molecules by the electrochemical single molecule analysis of the nano channel. Methods： Analyze the affinity interaction between thrombin and thrombin reagent by using hemolysin and lecithin free assembly to biological nanopores through the characteristics of hemolysin aperture to control single stranded DNA and double stranded DNA. Results： The current signal was terminated because the double stranded structure which made up with cervical loop structure could not pass through the hemolysin nanopore. In addition， under high voltage， the structure of the neck ring was destroyed， and the DNA of the neck ring was ssDNA. Conclusion： There is no relationship between the DNA solution chain time and the double chain sequence of the structure of the neck ring， and the applied voltage is closely related. 　　Keywords：nano channel； electrochemical single molecule 　　【中图分类号】R-1 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）06-0213-02 　　凝血酶在临床医学领域当中具有一定的地位，其可以作用在血液当中的纤维蛋白原，促使其转变成为纤维蛋白，加速血液凝固，进而起到止血的作用。在临床当中主要应用于外伤、口腔、妇产科、消化道以及泌尿的止血[1]。本文笔者通过利用溶血素以及卵磷脂的自由组装形成生物纳米孔到，通过溶血素孔径的特性来控制单链DNA以及双链DNA通过孔径的时候不同电流下降，对凝血酶与是凝血酶试题的亲和作用给予分析研究，现报告如下。 　　1资料与方法 　　1.1试剂与仪器 　　1.1.1主要试剂 　　其中包括有SA（溶血素）、APLI（卵磷脂）、盐酸、NEase（限制性核酸内切酶）、Tris、正葵烷以及KCl。试验当中所使用的水全部为二次去离子水，实验所使用的试剂全部为分析纯。试验当中使用到的DNA片段全部参考相关文献进行设计。 　　1.1.2主要仪器 　　仪器：Axonpatch200B，DigiData1440A，离心机，冰箱BCD-162AG，202-1AB型电热恒温干燥箱，BS124S电子天平、KQ-600DB型数控超声波清洗器、SZ-93自动双重纯水蒸馏器、CJJ78-1型磁力加热搅拌器、磁力架、数值式水浴温度控制仪、可调式移液器、PHS-3DpH计以及气浴恒温振荡器。 　　1.2试验方法 　　1.2.1DNA储备液和缓冲溶液 　　（1）全部DNA储备液都要采取二次水稀释为10-4M；（2）缓冲溶液Tris-HCl（10mM，pH7.8，1.0MKCl）：①：称取0.1