安徽省临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性变迁及相关耐药机制-内科学专业论文.docxVIP

 PAGE 56 参考文献97  缩略词表 缩略词 英文全称 中文全称 E. coli P.Aeruginosa S. maltophilia BLA CLSI CAZ TIC CIA CHL Escherichia coli Pseudomonas aeruginosa Stenotrophomonas maltophilia β-lactamases Clinical and Laboratory Standard Institute Ceftazidime Ticarcillin Clavulanic acid Chloramphenicol 大肠埃希菌 铜绿假单胞菌 嗜麦芽窄食单胞菌 β-内酰胺酶 （美国）临床实验室标准协会 头孢他啶 替卡西林 克拉维酸 氯霉素 SMZ Sulfamethoxazole磺胺甲基异恶唑 TMP Trimethoprim甲氧苄啶 MIN Minocycline米诺环素 LVX Levofloxacin左氧氟沙星 PCR Polymerase chain reaction聚合酶链反应 ISCR Insertion element common region插入序列 QNR InⅠ Quinolone resistance gene Class ⅠIntegron喹诺酮耐药基因 Ⅰ类整合子In Ⅱ In Ⅲ IS CDS Tn In intI1Class ⅡIntegron Class Ⅲ Integron Insertion sequence Code sequence Transposons Integron ClassⅠ integraseⅡ类整合子 Ⅲ类整合子 插入序列 编码序列 转座子 整合子 Ⅰ类整合酶 MICMinimal inhibitory concentration最低抑菌浓度 PCR Polymerase chain reaction聚合酶链反应 TAIL-PCR Termal Asymmetric Interlaced PCR热不对称交错 PCR ATCC American type culture collection美国模式培养物收藏所 摘 要 安徽省临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性变迁 及相关耐药机制 中文摘要 目的 了解2005-2010年安徽省临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌对临床常见药物的敏感 性及耐药性变化，对其医院感染特征进行多因素分析，探寻引起医院感染的相关 危险因素，并通过基因同源性分型，推测菌株地流行性趋势，为控制医院感染的 发生提供科学的理论依据。 检测 2005-2008 年 4 年期间收集的临床分离嗜麦芽窄食单胞菌耐药基因型及获 得性耐药特性并分析其与耐药表型的关系，从而为嗜麦芽窄食单胞菌感染的防治 提供理论依据和对策。 材料与方法 菌株来源 收集安徽省细菌耐药性监控网中的 34 家不同级别医院 2005 年至 2010 年 6 年 期间每年 9 月份的临床分离嗜麦芽窄食单胞菌 188 株，采用全自动微生物分析仪 对标本进行重新鉴定。 方法 根据 2009 年美国临床与实验室标准委员会推荐的的标准，采用琼脂平皿稀释 法，开展 188 株安徽省细菌耐药性监控中心收集的嗜麦芽窄食单胞菌对临床常用 6 种抗菌药物进行药物敏感实验，应用随机引物 PCR 方法对菌株进行基因分型分析 菌株克隆流行传播情况，并对药敏结果及对其医院感染特征进行统计学分析。 对 2005-2008 年收集的 102 株嗜麦芽窄食单胞菌提取全基因组 DNA，采用 PCR 方法检测 β-内酰胺酶、喹诺酮耐药基因 qnr、 复方磺胺耐药基因 sul 和 dfrA，分析  耐药基因与耐药表型的关系；并采用 PCR 方法对这些菌株扩增各类整合子。 对Ⅰ类整合酶阳性菌株扩增可变区检测其携带的耐药基因盒，可变区阳性片断 PCR 产物凝胶电泳后各片段纯化后克隆入 T 载体，表达于感受态细胞 E. coli JM109 后提取质粒测序，结果至 GenBank 比对，进行 DNA 序列分析，了解整合子携带的 各种耐药基因。 对 sul2 基因阳性菌株采用热不对称交错 PCR 和测序的方法，研究 sul2 基因 3’ 端和 5’端未知侧翼碱基序列，结果至 GenBank 比对，进行 DNA 序列分析。以了 解该耐药基因是否与整合子、插入序列(ISCR)及转座子相连，初步预测该基因是否 可能导致快速的水平或垂直传播。 结果 我们分析本地区 2005-2010 年嗜麦芽窄食单胞菌在常见非发酵菌的感染比率， 发现嗜麦芽窄食单胞菌临床感染率从 2005 至 2009 年有逐年上升趋势，其中