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肝脾舒对肝硬化大鼠内毒素血症影响 　　【摘要】 目的 探讨肝脾舒对肝硬化大鼠血浆内毒素是否有调节作用。方法 雄性SD大鼠36只， 随机分为正常组、模型组、肝脾舒组、杜秘克组， 每组9只。正常组：每日腹腔注射生理盐水， 模型组：采用40%CCl4橄榄油溶液腹腔注射制备肝硬化模型， 肝脾舒组在此基础上每日给予肝脾舒灌胃， 杜秘克组在模型组基础上每日给予杜秘克灌胃。取血检测血浆内毒素（LPS）水平。结果 3个月后模型组大鼠血浆内毒素水平较正常组升高（P0.05）；与模型组相比， 肝脾舒组血清内毒素水平降低（P0.05）。结论 肝脾舒对肝硬化大鼠血浆内毒素水平有调节作用。 　　【关键词】 四氯化碳；肝硬化；肝脾舒；内毒素 　　DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.09.212 　　1 材料与方法 　　1. 1 主要试剂 　　四氯化碳由成都科龙化工试剂厂生产， 批号：150508。 　　内毒素（lipopolysaccharide， LPS）试剂盒为南京建成科技有限公司的产品。 　　1. 2 分组与处理 　　雄性SD大鼠， 36只， 清洁级， 体重（200±20）g， 购自中科院实验动物中心， 饲养在上海中医医院实验动物中心。所有动物在有恒温、恒湿及昼夜光线变化的房间里饲养， 自由进食、进水， 适应性饲养一周后开始实验。 　　造模：本实验选用四氯化碳法造模 ， 将大鼠按体重分数予以40%CCl4溶液腹腔注射 ， 0.3 ml/100 g体重， 首剂加倍， 隔日1次， 造模90 d形成肝硬化模型。 　　分组：将36只大鼠随即分为4组， 正常组、模型组、肝脾舒组、杜秘克组， 每组9只。 　　给药：各组在造模同时给药， 肝脾舒组20 ml/kg灌胃， 正常组、模型组则用同等容量的生理盐水灌胃， 杜秘克组按每日0.01mg/kg体重灌胃， 各组连续给药90 d， 自由饮水， 普通饲料喂养。 　　检测指标：实验90 d后， 即用乌拉坦（1.25 g/kg）行腹腔麻醉， 取血检测血浆中内毒素水平， 取肝左叶于10%中性甲醛固定后行HE染色。 　　1. 3 检测方法 ①血清指标检测 检测血浆中内毒素水平 操作步骤按试剂盒说明书严格进行 采用723 型分光光度计检测②肝、回肠组织HE染色 经甲醛固定后取肝组织及回肠组织石蜡包埋 切片脱蜡水化 常规HE染色后普通光镜下观察肝组织及回肠组织病理变化。 　　1. 4 统计学方法 所有数据均采用SPSS16.0统计学软件分析。多组间比较以均数±标准差 （ x-±s）表示， 采用单因素方差分析， 两两比较方差齐时用LSD-t法， 方差不齐时用DunnettsT3 法。P0.05表示差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2. 1 与正常组相比， 模型组血浆内毒素水平升高（P0.05）。各组大鼠血浆内毒素水平见表1。 　　表1 各组大鼠血浆中内毒素水平（ x-±s） 　　组别 只数 LPS 　　正常组 　　模型组 　　肝脾舒组 　　杜密克组 9 　　9 　　9 　　9 0.075±0.022 　　0.145±0.048a 　　0.088±0.028b 　　0.102±0.042 　　注：与正常组对照相比， aP0.05；与模型组相比， bP0.05 　　2. 2 肝组织HE染色结果 正常组大鼠肝组织结构完整、清晰， 肝小叶正常， 肝细胞排列规则成索状， 在中央静脉周围呈放射状分布， 肝血窦结构清晰， 无异常改变。肝细胞呈多边形， 胞浆均匀， 细胞核形态正常；模型组大鼠肝组织结构松散、紊乱、有大量点状坏死及灶状坏死、肝索消失， 肝间质广泛纤维组织增生， 将正常肝小叶分割成大小不等的肝细胞团（即假小叶形成）；肝脾舒组肝小叶结构受损， 少数肝细胞气泡样变性但仅偶见坏死细胞， 少量纤维组织增生， 但未见形成间隔；杜秘克组肝小叶结构被破坏， 部分肝细胞气泡样变性并伴有细胞坏死， 纤维组织增生， 但较少形成间隔。回肠HE染色显示正常组大鼠肠绒毛排列整齐， 结构完整， 长短基本一致， 无绒毛倒伏、脱落现象。模型组大鼠肠绒毛缩短、表面长短不一、结构紊乱、大部分绒毛出现断裂及坏死脱落、肌层增厚；肝脾舒组和杜秘克组肠绒毛局部变短、排列基本整齐、结构尚完整， 部分绒毛有脱落、倒伏情况好转， 肌层增厚。 　　3 讨论 　　肝硬化患者易发生全身各系统严重并发症， 病死率高， 临床和实验研究均充分证实了肠屏障功能障碍在肝硬化并发症的发展中所起的关键作用[1-3]。肝硬化患者常伴有肠源性内毒素血症（ intestinal endotoxemia， IETM）[4]， 而肠黏膜屏障损伤是形成IETM的关键环节， 肠道黏膜下固有层含有大量的肥大细胞，