耳背静脉放血治疗扁平疣及对外周血T淋巴细胞亚群影响.docVIP

耳背静脉放血治疗扁平疣及对外周血T淋巴细胞亚群影响 　　[摘要]目的：观察耳背静脉放血治疗扁平疣的临床疗效及检测其对外周血T细胞亚群的影响。方法：应用耳背静脉放血治疗扁平疣患者35例，双侧耳背每周放血1次，疗程15周。观察疗效并于治疗前后抽取患者的静脉血，采用流式细胞仪检测患者外周血T淋巴细胞亚群。结果：完成随访的33例患者总有效率为84.85%。患者在治疗前CD4+和CD4+/CD8+比值明显低于正常对照组（P0.05）。结论：耳背静脉放血治疗扁平疣有较好的临床疗效，可调节患者外周血T淋巴细胞亚群水平，提高患者的细胞免疫功能，导致疣体脱落。 　　[关键词]扁平疣；耳背静脉放血；T淋巴细胞亚群；流式细胞仪 　　[中图分类号]R752.5+2 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2013）09-0950-03 　　扁平疣是由人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染引起的表皮良性赘生物，常侵犯青少年的颜面、手背及前臂，其发生、发展和消退与机体的免疫功能状态密切相关，尤其是细胞免疫。治疗上主要有物理治疗（如激光、冷冻等），抗病毒治疗及免疫疗法（主动免疫及被动免疫）等。耳穴治疗扁平疣在我国已有多年历史，且疗效确切，总有效率为70%～100%，平均为91%，但既往的研究主要局限于临床疗效观察[1]。为探讨耳穴疗法治疗扁平疣的免疫机制，本研究应用耳穴疗法中常用的耳背静脉放血法治疗扁平疣，并观察临床疗效和检测其治疗前后外周血T淋巴细胞亚群的水平，从免疫学的角度了解耳背静脉放血对扁平疣患者免疫状态的影响。 　　1 资料和方法 　　1.1一般资料：实验组为2011年9月～2012年6月在遵义医学院附属医院皮肤科门诊就诊的扁平疣患者35例，均符合扁平疣的临床诊断标准[2]，完成耳背静脉放血治疗患者33例，失访2例。在完成随访的病例中，男性12例，女性21例，年龄9～47岁，平均（21.97±7.54）岁，病程2月～7年，平均（2.09±1.75）年；患者皮损主要发生于面部和手背，少部分为颈部和前臂。入选患者3个月内未接受过干扰素、胸腺肽及IL-2等抗病毒及免疫调节剂治疗，且2月内均无突然增多、发红、发痒等症状；不伴有自身免疫性疾病、严重的系统性疾病和其他病毒感染性疾病。正常对照组15例，均为健康志愿者，其中男性6例，女性9例，平均年龄（26.28±4.25）岁。两组性别和年龄方面无明显差异；所有患者及对照组成员均知情同意。 　　1.2 耳背静脉放血治疗方法：患者取坐位，选患者耳背上1/3近耳轮处明显静脉1支，揉搓使其充血，75%酒精消毒后用左手拇指、食指将耳背拉平，中指顶于下，右手持消毒刀片，迅速刺破血管，挤压出血约10滴，血止后，再以1cm×1.5cm大小的两层消毒纱布敷于伤口上，并用胶布固定。双侧耳背每周放血1次，疗程15周，治疗过程中若疣体脱落即停止治疗。 　　1.3 疗效判定标准：痊愈：皮损全部消退，无新出皮疹；显效：皮损消退70%；有效：皮损消退在3O%～7O%或有个别新出皮疹；无效：皮损无变化或消退不足30%。总有效率=（痊愈例数+显效例数+有效例数）/总例数×100%。 　　1.4 样本采集：无菌条件下分别采集患者治疗前、治疗后及正常对照组EDTA抗凝静脉血2ml立即送检。 　　1.5 试验方法 　　1.5.1 仪器与试剂：FACSCalibur流式细胞仪（美国BD公司）。主要试剂：外周血CD4-FITC/CD8-PE/ CD3-PerCP三色抗体、FACS Lysing Solution红细胞裂解液（均来自美国BD公司）。 　　1.5.2 实验操作：样品测定管中加入荧光抗体CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PerCP20μl，抗凝血50μl混匀，避光静置20min，再加入红细胞裂解液200μl充分混匀，避光静置15min后使用流式细胞仪进行检测。激光室工作波长488nm，FITC受激发后发绿色荧光，PE受激发后发橙色荧光，PerCP受激发后发深红色荧光，每份样品检测20 000个细胞。测定结果采用MultiSET功能软件分析。 　　1.6 统计学处理：采用SPSS17.0统计软件对所得数据进行治疗前后配对t检验，组间比较采用成组t检验；以P0.05为差异有统计学意义。数据采用 x±s表示。 　　2 结果 　　2.1 临床疗效：33例患者治疗后痊愈20例（60.61%）；显效5例（15.15%）；有效3例（9.09%）；无效5例（15.15%）；总有效率为84.85%。其中治愈患者中有18例在治疗4～8周后局部皮疹突然增大、发红、发痒或出现新发皮疹（起效标志），继续治疗2～3周后疣体脱落痊愈；2例患者皮疹消退无上述反应过程，仅表现为原有皮疹逐渐变平至完