芪冬颐心口服液对脑梗死大鼠神经保护作用实验研究.docVIP

芪冬颐心口服液对脑梗死大鼠神经保护作用实验研究 　　[摘要] 目的 研究芪冬颐心口服液对脑梗死大鼠的神经保护作用。 方法 50只雄性SD大鼠随机分为假手术、模型组、芪冬颐心口服液高、中、低剂量组，于脑梗死模型建立后2h给药干预，连续给药14d，观察芪冬颐心口服液对脑梗死大鼠神经功能、脑组织SOD（超氧化物歧化酶）、MDA（丙二醛）及神经凋亡相关蛋白Bcl-2表达的影响。 结果 与模型组比较，芪冬颐心口服液高、中、低剂量组能显著改善神经功能情况、提高脑组织中SOD含量，降低MDA含量，并抑制Bcl-2蛋白的表达（P0.05，P0.01）。 结论 芪冬颐心口服液对脑梗死大鼠具有一定的神经保护作用。 　　[关键词]芪冬颐心口服液；脑梗死；Bcl-2 　　[中图分类号] R743.3 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2014）23-37-03 　　芪冬颐心口服液主要由黄芪、麦冬、生晒参等成分组成，活血化瘀的作用显著，适用于胸痹、心悸气阴两虚症。芪冬颐心口服液在临床上主要用于冠心病、动脉硬化等病的治疗。芪冬颐心口服液能否用于脑梗死的治疗，目前还没有相关研究。因此，本研究将采用脑梗死大鼠模型来观察芪冬颐心口服液对急性脑梗死的疗效情况。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 动物 50只SPF级雄性SD大鼠，体重（250±20）g，购自重庆医科大学实验动物中心。 　　1.1.2 试剂 芪冬颐心口服液（白山药业有限责任公司。SOD、MDA试剂盒购自南京建成生物工程研究所，Bcl-2 Elisa试剂盒，购自美国RD公司。 　　1.2 方法 　　1.2.1 动物分组 50只大鼠按照配对设计的方法随机分为5组：假手术组（n=10）、模型组（n=10）、芪冬颐心口服液高剂量组（n=10）、芪冬颐心口服液中剂量组（n=10）、芪冬颐心口服液低剂量组（n=10）。除假手术组外，其余各组均用线栓法经左侧颈外动脉-颈内动脉插线制造急性脑梗死模型，假手术组除不插线栓以外，其余操作步骤与其他组相同。术后2h出现左侧Horner征，提尾时右前肢内收屈曲、爬行时向右侧划圈者为成功模型，脑梗死后2h，开始灌胃，假手术组和模型组灌胃生理盐水，1mL/d，高剂量组灌胃芪冬颐心口服液，2mL/d，中剂量组灌胃芪冬颐心口服液，1mL/d，低剂量组灌胃芪冬颐心口服液0.5mL/d，连续14d。 　　1.2.2 脑梗死模型的制作用 10%的水合氯醛按照1mL/kg的剂量麻醉大鼠，分离右侧颈总动脉，结扎颈外动脉，血管夹夹住颈总动脉近心端，再于颈总动脉上剪一小口，将尼龙线从小口插入，向颈内动脉推进1.8～2.0cm，此时大脑中动脉的血供被阻断[1]。假手术组除了不插线栓外，其余步骤操作相同。 　　1.2.3 神经功能障碍评分 脑梗死后2h，采用Zealonga的方法[2]，对大鼠进行神经功能评分。无神经症状，0分；不能完全伸展对侧前爪，1分；爬行时向对侧旋转，2分；行走时倾倒，3分；丧失意识，4分；死亡，5分。选择1～3分大鼠进行实验。14 d后再对大鼠进行神经功能评分。 　　1.2.4 SOD、MDA含量检测 在给药第14d，最后一次给药后2h，迅速断头取脑，冰浴中去除脑膜和残血，加入4oCPBS制成10%脑匀浆液，严格按照试剂盒说明书测定SOD和MDA含量。 　　1.2.5 Bcl-2含量检测 严格按照Bcl-2 Elisa试剂盒对得到的脑组织匀浆中的Bcl-2含量进行检测。 　　1.3 统计学方法 　　采用SPSS20.0软件进行统计分析，数据均以（）表示，组间比较采用t检验，P0.05为差异具有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 神经功能评分 　　与假手术组比较，其余各组神经功能评分发生显著性增加。与模型组相比较，芪冬颐心口服液高、中、低剂量组神经功能明显改善，具有显著性差异（P0.01或P0.05）。见表1。 　　2.2 脑组织SOD、MDA含量结果 　　与假手术组比较，其余各组中SOD含量显著降低，MDA含量显著升高。与模型组相比较，芪冬颐心口服液高、中、低剂量组能显著增加SOD含量，降低MDA含量。（P0.05或P0.01），见表2。 　　2.3 脑组织Bcl-2表达的影响 　　与假手术组比较，其余各组脑组织中Bcl-2表达增加。与模型组相比较，芪冬颐心口服液高、中、低剂量组显著提高脑组织中Bcl-2的表达（P0.05或P0.01）。见表3。 　　3 讨论 　　脑梗死是严重威胁人类生命健康的三大杀手之一，我国脑梗死发病率较高[3]，大部分脑梗死患者都会留下后遗症甚至丧失劳动力和自理能力[4]。 　　研究已经证实在脑梗死的发生和发展过程中，自由基的水平对疾病