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肝硬化患者HBsAg定量检测分析 　　【摘要】目的 研究HBsAg定量测定在乙肝相关性肝硬化病程中的变化和意义。方法 选择乙肝相关性肝硬化患者60例纳入实验对象，根据2000年病毒性肝炎防治方案肝硬化的临床诊断标准分为失代偿期组和代偿期组，其中代偿期组35例，失代偿期组25例。另选取20例乙型肝炎病毒携带者作为对照组。应用电化学发光免疫分析法测定患者血清中HBsAg和HBeAg滴度，免疫荧光定量PCR法检测HBV DNA载量。结果 对照组、肝硬化代偿期组和肝硬化失代偿期组HBsAg滴度分别为(x±s)：2574.73±3252.27COI、5494.35±2129.84COI和6921.25± 1957.60 COI，各组之间差别均有统计学意义（pO．05）。肝硬化代偿期组中，HBsAg滴度与HBV DNA无相关性（P＞O．05），与HBeAg水平呈负相关性（pO．05）。肝硬化失代偿期组中，HBsAg滴度与HBV DNA及HBeAg水平均无明显相关关系（P＞O．05）。结论 肝硬化失代偿期HBsAg滴度明显高于肝硬化代偿期，代偿期HBsAg滴度高于HBV携带者。即HBsAg滴度随疾病进展呈阶梯型递增。肝硬化代偿期，HBsAg滴度与HBeAg水平呈负相关性，考虑HBsAg水平可以作为评估病毒复制的参考指标。肝硬化失代偿期，HBsAg滴度与HBV DNA和HBeAg无相关性，不能反映病毒复制水平，不能作为评估病毒复制的参考指标。 　　【关键词】HBsAg；HBV DNA；HBeAg；肝硬化；定量 　　【中图分类号】R33.1 【文献标识码】A 【文章编号】1005-0515(2011)07-0177-01 　　 　　乙肝表面抗原（HBsAg）是病毒颗粒的外膜组成部分，是由S基因编码的外膜蛋白。HBsAg是患者感染HBV病毒后最早出现的血清学标志，HBsAg的血清学转换是乙肝患者治愈的金标准。乙肝病毒共价闭合环状DNA(HBV CCCDNA)是HBV前基因组RNA转录产物最原始的模板，是乙肝病毒持续感染的关键因素，因此，它也是乙肝病毒复制最特异的指标。但目前通过肝活检来检测患者肝组织中的HBV CCCDNA水平在实际临床应用中仍相当困难，故探讨能反映其水平的非侵入性替代检测指标非常具有现实意义。有文献报道[1,2]HBVcccDNA与血清HBsAg水平及血清HBV DNA水平相关，HBsAg定量检测可作为替代标记。本研究旨在分析肝硬化患者中HBsAg定量与HBV DNA、HBeAg水平的相关性，以期找到一种有效、廉价、方便的替代标记对HBV病毒的复制状况进行评估，作为HBV DNA检测的一项重要补充。 　　1 资料与方法 　　1.1 标本来源:收集我院感染科、消化内科乙肝相关性肝硬化患者血清标本60例纳入实验对象，并以慢性乙型肝炎携带者血清标本20例作为对照组。所有患者的诊断均符合2000年9月(西安)第10次全国病毒性肝炎学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准。肝硬化患者根据诊断标准分为肝硬化代偿期组(n = 35)和肝硬化失代偿期组(n =25)。所有标本均应排除以下疾病：①甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染；②自身免疫性肝炎；③肝豆状核变性；④原发性胆汁性肝硬变；⑤药物或酒精中毒引起的肝硬化；⑥既往有抗病毒用药史；⑦保肝药应用大于一周；⑧合并其他部位的疾病，如糖尿病、高血压、心血管疾病、肺部疾病；⑨合并肝脏肿瘤及其他部位的肿瘤。 　　1.2 检测方法:HBsAg和 HbeAg定量检测：应用电化学发光免疫分析法（ECLIA）测定患者血清中HBsAg和HBeAg滴度，仪器为罗氏Elec-sys2010，试剂由罗氏公司生产。HBV-DNA检测：应用免疫荧光定量PCR法检测HBV DNA载量，仪器为PE5700荧光定量PCR系统，试剂由中山大学达安基因股份有限公司生产，正常参考值10?3copies／ml。操作按试剂盒说明书进行。 　　1.3 统计学处理:应用Microsoft Access软件建立数据库，整理后用SPSS 11.5统计软件包进行分析。组间比较运用单因素方差分析，组内相关性运用Pearson相关分析进行处理。数据以均数±标准差(x±s)表示，相关系数用r表示，取P=0.05为检验标准,P0.05为差别有统计学意义。由于HBV DNA和HBeAg定量值为非正态分布，故经对数转换后使其符合正态分布后再行统计学检验。 　　2 结果 　　2.1 HBsAg、HBV DNA及 HBeAg的检测结果:HBsAg滴度在携带者组最低，肝硬化代偿期组次之，肝硬化失代偿期组中最高。三组之间比较均有明显差别（PO．05）。HBV DNA载量在携带者组最高，肝硬化代偿期组次之，肝硬化失代偿期组最低。但三组间比较，