花药培养在中美水稻杂交新品系选育中应用.docVIP

花药培养在中美水稻杂交新品系选育中应用 　　摘要：以5份中国稻种质资源、2份美国稻种质资源为亲本，灵活运用单交、回交、花药培养等育种手段，实现中美水稻亲本之间有利基因的互补、叠加、纯合。通过对MS培养基的营养成分及其浓度进行精量调整，促进愈伤组织的诱导、分化，提高成苗率，选育出具有高产、优质、多抗、光温钝感广适性水稻新品系24份，按其株叶形态分为2类，其中改良型中国水稻18份，改良型美国水稻6份。 　　关键词：水稻；花药培养；美国稻；育种 　　中图分类号：S511.03文献标志码：A文章编号：1002-1302（2017）06-0065-03 　　水稻是我国最主要的粮食作物之一，我国有50%以上人口以稻米为主食，随着农业生产的发展和人民生活水平的不断提高，稻谷在粮食中的比重将继续增长。但是，在耕地资源有限的前提下，如何提高水稻单位面积的产量，对保障我国的粮食安全具有重要的意义。当前，水稻育种中产量长期停滞不前，品质和抗性也有待提高，其中一个重要的原因在于目前我国各地的主栽品种基因的遗传基础狭隘，育种工作者所选用的杂交亲本遗传差异小，很难使当前水稻的发展更上一个台阶。近年，有学者对中美两国水稻的基因遗传背景进行调查，发现其多态率（遗传差异）高达93.65%[1]。因此，推动水稻育种的国际化，使用不同国家水稻资源尤其是中美水稻材料进行杂交[2]，扩大杂交亲本之间的遗传差异，充分提高水稻的杂种优势，对当前的水稻育种乃至世界粮食的安全都有巨大的推动作用。 　　中美水稻亲缘关系较远，杂交后代分离疯狂且难于稳定[3]，育种选择难度大，如何提高中美水稻杂交的选育效果，加速后代稳定是一个需要解决的问题。花药培养是一种双单倍体育种方法，具有提高选择效率、缩短育种年限、纯合目标性状等众多优势，通过花药培养技术与常规育种技术相结合，可以快速稳定中美水稻杂交后代。本研究以中美两国水稻为亲本，灵活运用单交、回交等育种手段，实现中美水稻亲本之间有利性状的互补、叠加；借助花药培养技术快速稳定目标性状，实现中美水稻优良基因的聚合。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　中国稻种质资源5份：镇稻88、镇稻16号、镇稻18号、嘉禾218、H6/511；美国稻种质资源2份：DG9911772、P1002。 　　1.2方法 　　通过中国水稻与美国水稻单交、回交，取BC1F1、BC1F1′、F2稻穗进行花药离体培养，一方面选育适宜在中国种植的具有优质、高光效、光温钝感、综合农艺性状优良的中国水稻品系，另一方面选育适宜在美国生长的结实率高、单产高的美国水稻品系。 　　2中美水稻选育流程 　　以下以镇稻88与DG9911772杂交选育为例，结合图1、表1说明中美2种类型水稻新品系的选育流程。 　　（1）中美水稻杂交配组：使用江苏品种镇稻88，美国水稻资源材料DG9911772进行杂交配组F1代。 　　（2） 将步骤（1）中得到的F1代分别与镇稻88和美国稻资源材料DG9911772回交得到BC1F1、BC1F1′，再从BC1F1、BC1F1′中选单株分别进行花药离体培养，选育具有优质、高光效、光温钝感、综合农艺性状倾镇稻88的改良型单株，选育具有结实率高、单产高的倾DG9911772的改良型单株。 　　（3） 从F2中选综合农艺性状倾镇稻88、DG9911772单株分别进行花药离体培养，根据需要选育具有优质、高光效、光温钝感、综合农艺性状倾镇稻88的改良型单株；选育结实率高、单产高的倾DG9911772改良型单株，具有优势性状但还需要改良的中间材料分别与镇稻88和美国水稻DG9911772杂交，再利用花药培养加速稳定，实现目标性状的 　　改良。 　　（4）品系鉴定筛选：综合考虑产量、品质、抗性、光温反应等性状，选出最优品系进行优势鉴定。 　　3花药培?B流程 　　由于中美水稻基因遗传背景的差异，花药培养使用三步成苗法，对诱导、分化、生根3个不同发育阶段的营养成分及浓度进行精量调整，促进愈伤组织的诱导、分化，提高成苗率。 　　3.1改良型MS培养基成分 　　3.1.1供试水稻材料花药培养所用培养基母液按10倍浓度计算，母液A（大量元素）包括如下组分：KNO3 30 g/L、NH4NO3 16.5 g/L、KH2PO4 5 g/L、MgSO4?7H2O 3.7 g/L、CaCl2 4.4 g/L。按100倍浓度计算，母液B（微量元素）包括如下组分：ZnSO4?7H2O 500 mg/L、MnSO4?H2O 1 000 mg/L、H3BO3 500 mg/L、CuSO4?5H2O 2.5 mg/L、KI 83 mg/L、Na2MoO4?2H2O 25 mg/L、CoCl2?6H2O 2.5 mg/L。按100倍浓度计算，母液C（铁盐）