藻类与高等植物中植物螯合肽PCs研究进展.docVIP

藻类与高等植物中植物螯合肽PCs研究进展 　　摘 要：植物螯合肽（PCs）是重金属螯合肽，对高等植物、真菌、微藻中有毒重金属的解毒起着重要作用。介绍了PCs生物合成和功能的最新研究进展。 　　关键词：植物螯合肽；植物螯合肽合酶；重金属结合肽；高等植物；藻类 　　中图分类号：Q946.5 文献标识码：A DOI编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2014.04.004 　　1985年，研究人员将从经镉处理后的高等植物悬浮细胞中分离出来的重金属结合肽称作植物螯合肽（PCs），。此后，PCs不断从一些真核生物中找到，包括高等植物、真菌和微藻。PCs不但可经Cd诱导合成，也可通过一些其他有毒的、重要的重金属诱导合成，如Hg、Cu、Zn等。许多生理学研究指出，PCs的作用包括重金属脱毒和重要金属离子细胞内水平平衡的保持。1999年，PCs合成酶基因在高等植物和裂殖酵母中的存在被确定和描述。此后，PCs基因和PCs合成酶相似基因已确定存在于蠕虫和原核生物器官中。这些发现指出PCs在蠕虫以及一些与真核生物光合有机体相似的原核生物和菌类中对重金属脱毒起着重要的作用。 　　1 PCs的结构和功能 　　PCs的主要结构通常含有（γ-Glu-Cys）n-Gly形式。PCs通过重金属如Cd，Cu，Zn，Hg，Ag和As形成复合物。几个不同链长度的PCs分子接连着合成并立即与重金属形成复合物。例如在一个PCs-Cd复合物的结构模型中，Cd协调地从单个或复合的PCs分子中结合1个，2个，3个或最大容量4个S原子，最终导致形成无定形的复合物[1]。PCs链越长，每个分子具有更强的pH稳定性和金属结合能力[2]。 　　重金属的毒性是因为生物直接结合金属离子而导致的功能性蛋白的失活，或者因为活性氧化物（ROS）加速增加导致的活性氧损伤[3-4]。在高等植物中， PCs的诱导合成是经重金属胁迫后与金属形成复合物以此来脱毒[5]。一个抗氧化活性分析显示，PCs分子在体外对ROS如H2O2和O2-有很强的去污活性。而且，对这些ROS耐受性的增强已经在绿藻杜氏盐藻（ATCC30929）中获得实现，通过用Zn对杜氏盐藻进行预处理导致PCs合成[6]。这些研究揭示了PCs不但对重金属的螯合，而且对由重金属引起的氧化胁迫的缓解都起着重要作用。 　　2 PCs的生物合成途径及其调控 　　PCs的生物合成由植物螯合肽合成酶（PCs合成酶）催化，这种酶需要重金属作为活化因子。Cd是这种酶最有效的催化剂，而其他重金属对它的催化程度都要比Cd小。 　　1999年，3个试验组分别证明了编码PCs合成酶的基因，即拟南芥AtPCS1基因、裂殖酵母SpPCS基因和小麦TaPCS基因。预测的由AtPCS1，TaPCS1和SpPCS编码的氨基酸序列分析显示，N端区域高度保守，而C端区域则不定。 　　在高等植物中， PCs合成酶通常是组成酶，即使暴露于重金属下，它的基因也不会被诱导。通过对拟南芥AtPCS1基因的Northern和RT-PCR分析已证明这点，研究还发现即使暴露于像Cd、Zn或Cu这样的重金属，或者氧化胁迫、盐胁迫、茉莉酸或水杨酸处理[7-8]，也没有AtPCS1转录调控。然而在植物发育的早期阶段，发现用Cd处理的拟南芥AtPCS1 mRNA水平比没用Cd处理的要高2倍。由此看来，在特异器官和发育阶段对有毒重金属需要很强的防御，PCs合成酶基因的表达可能被调控。 　　除了重金属能激活PCs合成酶，PCs合成酶也可被细胞内的GSH水平调控。众所周知，GSH的合成受氧化胁迫调控。高等植物中外源性应用或内源性产生的H2O2能增加GSH水平[9]。Xiang和Oliver指出[10]，经暴露于Cd后，PCs合成受到多样水平调控（多层次）。在他们提出的模型中，Cd通过激活PCs合成酶从GSH中诱导PCs的合成，并且提出GSH的合成不但通过GSH生物合成途径的转录激活，也需要靠ROS的内源性产物如H2O2的刺激。在杜氏盐藻中可能存在相似的重金属诱导PCs合成的调控机制。在这类绿藻中，经Zn处理的细胞中PCs合成水平明显要高于那些经Cd处理的细胞[11]。杜氏盐藻这个独特的特征是由于经Zn处理后导致细胞内H2O2水平增加从而促使GSH有很大的通量，而且与高等植物相比，Zn更加能活化PCs合成酶。 　　3 原核藻类PCs合成酶基因的确定与描述 　　通过使用NCBI-BLAST tool（http：//www.ncbi.nim ./blast/）来确定一些原核藻类中编码PCs合成酶相似蛋白的基因，这些原核藻类包括蓝藻发菜（一种淡水藻类）PCC7120（DDBJ/GenBank/EMBL accession no.AF384110），原绿球藻MIT931