蛹虫草生物学特性研究.docVIP

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蛹虫草生物学特性研究

蛹虫草生物学特性研究   蛹虫草的生物学性质为筛选优良菌株的一个依据,实验从不同的温度、PH值、碳氮源、菌丝体形态、菌丝体液体培养积累量业研究不同菌株的生物学特性,确定最佳生长条件,为进行菌株的丢弃建立初步的依据。   1.材料与方法   1.1试验材料   1.1.1供试菌株   蛹虫草菌株,由锦州食用菌协会实验室提供。   葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、MGSO4、VB1、酵母粉、琼脂、蔗糖、乳糖、半乳糖、可溶性淀粉、甘露醇、麦芽糖、大豆蛋白胨、酵母膏、牛肉膏、硝酸铵、硫酸铵、尿素。   1.1.2主要仪器   医用型净化工作台、立式自控电势压力蒸汽灭菌器、电势恒温鼓风干燥箱、酸度计。   1.1.3培养基   PDA加富培养基:马铃薯20g,葡萄糖20g、蛋白胨2g、KH2PO43g、MGSO41.5G、VB11g,加水至1000ml。   基础培养基:葡萄糖20g、酵母粉2g、KH2PO42g、MGSO41g、琼脂20g,加蒸馏水定容至1000ml。   1.2试验方法   1.2.1供试菌株的活化   将供试菌株用灭过菌的接种铲取1*1cm的菌块接种到斜面PDA培养基上,25℃下恒温培养10天。每天菌株做10次重复。   1.2.2培养方式   将斜面菌种用灭过菌的接种铲取1*1cm的菌块接种到直径9cm的培养皿中心,在25℃下恒温培养10天,每个菌种做5次重复。   用直径5mm的无菌打扎器取早虫草菌片接种至PDA平板中央,将平板分别置于培养室自然光照培养,观察菌落形态。每个菌种3次重复。   1.2.3温度对早虫草生长速度的影响   分成五个温度梯度:17℃、20℃、23℃、26℃、29℃。用5MM无菌打扎器打扎接种到PDA培养基中心。每个菌种做8个重复,每个温度2个重复。每24H用游标卡尺测量菌落直径,计算菌丝生长速度,并观察菌落的变化及其生长状况。   1.2.4 PH值对蛹虫草生长速度的影响   分成五个PH酸度:PH5.5、PH 6.0、PH 6.5、PH 7.0、PH 7.5。用直径5mm无菌打扎器打扎接种到不同的PH值培养基中心中,每个菌种做3个重复。在23℃恒温下培养,每24H用游标卡尺测量菌落直径,计算菌丝生长速度,并观察菌薄的变化及其生长状况。   1.2.5碳源对蛹虫草生长速度的影响   其它培养基配方不变,分别选用葡萄糖、蔗糖、乳糖、半乳糖、可溶性淀粉、甘露醇和麦芽糖作为碳源添加到固体基础培养基中,在23℃条件下恒温培养。每24h用游标卡尺测量菌落直径,计算菌丝生长速度,并观察菌丝长势和菌丝体颜色及形态,筛选出适合蛹虫草菌丝体生长的碳源。   1.2.6氮源对蛹虫草生长速率的影响   其它培养基配方不变,分别选用蛋白胨、大豆蛋白胨、酵母膏、牛肉膏、硝酸铵、硫酸铵和尿素作为氮源添加 到固体基础培养基中,CK为基础培养基不加氮源。在23℃条件下恒温培养。每24H用游标卡尺测量菌落直径,计算菌丝生长速度,并观察菌丝长势和菌丝体颜色及形态,筛选出适合蛹虫草菌丝体生长的氮源。   1.2.7液体培养主生物量的测定   用无菌的打扎器取相同量的菌片置于液体培养基,摇瓶培养7天后,四层纱布过滤,菌丝体60℃,烘干至恒重后,测定不同菌株的生物量。   2.结果与分析   2.1温度对蛹虫草生长速度的影响结果   不同菌株的菌丝体在29度都不再生长,说明蛹虫草菌株是不耐高温的。而在17-26度都要不同程度的生长,可以看出菌丝体的生长速度随着温度的升高而加快,到23度时生长最快,而到26度时有变慢,说明23度是蛹虫草菌株的生长最适温度。不同的菌株在相同的温度条件下生长速度相差不大其中,1号、2-3号的生长速度较慢;6号、2号、K36的生长速度较快。   2.2 PH值对蛹虫草生长速率的测定   在PH值5.5-7.5之间的菌丝体都有不同程度的生长。在6.0-6.5之间生长的较快,在5.5、7.5生长的较慢,表明蛹虫草菌株的最适生长PH值在6.0-6.5之间。不同菌株在相同的PH值条件下的生长状况略有差别,6号、2号和K36号的生长速度较快,并且观察它们的菌丝体形态,总体来看,6号菌丝生长最快,菌落整齐,绒毛状,橘艾勇,转色比较好;2号菌丝生长也较快,菌落整齐,放射状,橘黄色,转色好,其它的菌株都比6号菌株萌发迟缓、长势差,1号生长最为?新?,长势最差,毡状,淡黄色,较色慢。   2.3碳源对蛹虫草生长速度的测定结果   在没的碳源条件下,菌丝体都能生长。其中葡萄糖和蔗糖作为碳源的条件下,菌丝体生长速度较快,而在半乳糖和麦芽糖作为碳源时,菌丝体生长较慢。观察不同碳源条件下菌丝体的形态,可以看出,虽然半乳糖作为碳源时生长速度也较快,但是菌丝稀松,

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