解偶联蛋白2在PM2.5致心肌细胞损伤中作用机制初步探讨.docVIP

解偶联蛋白2在PM2.5致心肌细胞损伤中作用机制初步探讨 　　[摘要] 目的 初步探讨解偶联蛋白2（UCP2）在PM2.5致心肌细胞损伤中的作用。 方法 培养大鼠心肌细胞株H9C2细胞，给予siRNA和（或）PM2.5刺激，48h后检查肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH），RT-PCR及Western Blot检测UCP2基因转录及蛋白水平，比色法检测线粒体的活性氧（ROS）和ATP酶的活性。 结果 与PM2.5组相比，PM2.5+siRNA组心肌细胞CK和LDH明显升高（969±21 vs 747±29U/mL，1071±59 vs 877±47U/L），ATP酶活性下降明显（24.7±4.7 vs 40.2±4.9U/mgprot），细胞内ROS明显增多（90.2±6.2 vs 69.2±6.3U/Well），差异均有统计学意义（P0.05）。结论 PM2.5可以导致UCP2基因表达代偿性增多及心肌细胞损伤；RNA干扰沉默UCP2基因，会导致心肌损伤进一步加重；提示UCP2在PM2.5致心肌损伤过程中可能起着保护作用。 　　[关键词] 解偶联蛋白2；PM2.5；H9C2；心肌细胞；线粒体；活性氧；ATP 　　[中图分类号] R730.2 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2015）01-40-05 　　[Abstract] Objective To investigate the effect of UCP2 during the injury procedure of PM2.5 on the rat myocardial cells H9C2. Methods Rat cardiomyocytes H9C2 cell lines were cultured， after 48 hours of given PM2.5 and （or） siRNA stimulus， creatine kinase （CK） and lactate dehydrogenase （LDH） were detected. The expession of UCP2 in transcription and translation levels was detected by RT-PCR and Western Blot respectively. Mitochondrial reactive oxygen species （ROS） and ATP enzyme activity were determinated by colorimetric detection. Results Compared with the PM2.5 group， CK and LDH were elevated （969±21 vs 747±29 U/mL，1071±59 vs 877±47 U/L）， ATP activity decreased （24.7±4.7 vs 40.2±4.9 U/mgprot）， intracellular ROS increased （90.2±6.2 vs 69.2±6.3 U/Well） in the PM2.5+siRNA group. And the differences were statistically significant （P0.05）. Conclusion PM2.5 can lead to myocardial cell damage and increased expression of UCP2 gene， and the silence of UCP2 by RNAi lead to aggravating injury of H9C2 cells， indicating that UCP2 may play an protective effect during the injury procedure of H9C2 caused by PM2.5. 　　[Key words] UCP2； PM2.5； H9C2； Myocardial cells； Mitochondria； ROS； ATP 　　近年来，大气污染备受关注，其中颗粒物是城市大气污染的重要物质。根据粒径大小可将其分为空气动力学直径介于2.5～10μm粗颗粒物（PM10）和空气动力学直径小于2.5μm的细颗粒物（PM2.5）。PM2.5与人体健康关系最密切。PM2.5化学成分复杂，包括无机成分、有机成分、微量重金属元素、元素碳等，主要来自于人类活动如工业生产及交通运输工具尾气排放、工业生产及取暖的燃烧释放、吸烟的烟雾释放等[1]。 　　动物试验及临床流行病学调查显示，PM2.5与