表油菜素内酯对高温胁迫下甘蓝幼苗抗逆性影响.docVIP

表油菜素内酯对高温胁迫下甘蓝幼苗抗逆性影响 　　摘要：以耐热甘蓝品种启夏和不耐热甘蓝品种苏甘25号为试材， 研究表油菜素内酯处理对高温胁迫下甘蓝幼苗耐热性相关生理指标的影响。结果表明，高温胁迫下，表油菜素内酯增加了超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）的活性，缓解了高温胁迫下MDA和H2O2的积累，增强了甘蓝抗氧化能力，提高了渗透调节物质脯氨酸和可溶性蛋白含量，有效缓解了高温胁迫对甘蓝幼苗的影响，其中以 0.5 mg/L 表油菜素内酯处理效果较显著。这表明，表油菜素内酯有利于降低高温胁迫对甘蓝幼苗的抑制作用。 　　关键词：表油菜素内酯；甘蓝；高温胁迫；耐热性；生长指标；生理指标 　　中图分类号： S635.101 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2015）07-0137-05 　　结球甘蓝（Brassica oleracea var. capitata）是十字花科芸薹属一种重要蔬菜，在中国种植广泛。高温是蔬菜生产中最常见的逆境因子，严重影响蔬菜的产量和品质。秋甘蓝播种一般在6―7月，幼苗期正值夏季高温，热胁迫会使甘蓝幼苗的生理代谢紊乱，生长受到抑制或造成徒长，育成的秧苗质量差，抗逆性弱，严重影响后期产量和品质[1]。因此，增强甘蓝幼苗的耐热性是生产中亟待解决的问题。油菜素内酯（brassinolide，简称BR）是一种新型植物生长调节剂，被称为第六大类植物激素， 在植物体内含量极低，但生理活性却极高，经极低质量浓度处理便能表现出明显的生理效应。研究结果表明，油菜素内酯可调节植物本身所需要的多种酶、激素，提高植物对许多胁迫，如水分、盐分及病害等的抗性[2-3]。人工合成的高活性油菜素内酯类似物为表油菜素内酯（24-epibrassinolide， 简称EBR）在生产上已广泛应用[4]。在抗高温方面，表油菜素内酯有利于甜瓜幼苗在高温胁迫下抗氧化酶活性的维持和对光能的捕获与转换，有效促进脯氨酸（Pro）的积累，Pro作为膜的稳定剂，增强了植物对不良环境的抵抗力，促进生长[5]。朱诚等报道，黄瓜种子用0.01～1 mg/L表油菜素内酯浸种24 h，能提高幼苗对热激（ 48 ℃， 90 min）的忍耐性[6]。康云艳等研究表明表油菜素内酯能促进低氧胁迫下黄瓜根系中抗氧化酶活性和 AsA、GSH 含量，降低 ROS 含量，增强黄瓜抗低氧胁迫的能力[7]；但有关表油菜素内酯对提高甘蓝耐热性的研究还未见报道。本试验以甘蓝品种启夏和苏甘25号为材料，研究高温胁迫下表油菜素内酯对甘蓝幼苗的生理调节效应及其机制。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　供试甘蓝品种为耐热品种启夏和不耐热品种苏甘25号。由江苏省农业科学院提供。试验于2014年7月15日在南京农业大学园艺学院网室内进行。种子催芽后播种于72孔穴盘，育苗基质为泥炭 ∶蛭石 ∶珍珠岩=2 ∶1 ∶1的混合基质， 萌发后每隔3 d浇1次营养液，育苗期平均温度为25 ℃，按常规方法进行统一管理，甘蓝2叶1心时进行表油菜素内酯和高温处理。 　　表油菜素内酯溶液设0（CK，喷施清水处理）、0.25、0.5 mg/L 3个质量浓度，幼苗3叶1心时，连续 4 d 喷施至叶面滴水，处理完后，放进光照培养箱进行高温胁迫处理，高温处理为42 ℃ 12h 光照/30 ℃ 12 h 黑暗，对照为22 ℃ 12h 光照/15 ℃ 12 h 黑暗，光照度为30 000 lx，处理 2 d 后，进行各项指标测定。 　　1.2 方法 　　1.2.1 生长指标测定 高温处理后，在每个处理穴盘中随机选取3株植株，测定其株高、根长、鲜质量。 　　1.2.2 生理生化指标测定 称取0.2 g各处理的幼苗叶片，置于预冷的研钵中，加入50 mmol/L、 pH值 7.8的磷酸缓冲液（PBS）5 mL 在冰浴中研磨提取，在4 ℃ 离心机中 9 000 r/min 离心20 min，取上清液定容至10 mL，上清液为酶提取液，用于超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）和抗坏血酸过氧化物酶（APX）测定。SOD 活性测定采用氮蓝四唑法[8]，CAT活性测定采用高锰酸钾滴定法[9]，POD活性测定采用愈创木酚法[9]，APX活性测定采用Nakano等的方法[10]。丙二醛（MDA）含量测定采用 TCA -TBA 法[8]，游离脯氨酸含量测定参照李合生等的方法[8]。过氧化氢（H2O2）含量的测定用碘化钾分光光度法[11]。可溶性蛋白含量测定采用考马斯亮蓝G-250染色法[12-13]。叶绿素含量测定采用光谱吸收法[14]。以上生理指标测定均设置3次重复。 　　1.2.3 数据处理 采用Origin软件进行