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钙对盐胁迫下杜梨叶片抗氧化系统影响 　　摘要：为探讨外源钙对盐胁迫下杜梨叶片抗氧化系统的影响，以梨砧木杜梨幼苗为供试材料，在水培条件下，研究外源施加不同浓度的钙对200 mmol/L NaCl胁迫下其叶片抗氧化酶活性、活性氧产生、膜质过氧化和抗氧化物质含量的影响。结果显示：NaCl胁迫3 d后，杜梨叶片中超氧化物歧化酶（SOD）活性减弱，过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽还原酶（GR）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）的活性增强，活性氧（O-2 ? 、H2O2）和丙二醛（MDA）大量积累，抗氧化物质谷胱甘肽（GSH）和抗坏血酸（AsA）合成下降。施加外源CaCl2能增强NaCl胁迫下杜梨叶片中SOD、POD、CAT、GR、GSH-Px、APX的活性，减少O-2 ? 和H2O2的产生，降低脂质过氧化程度，提高GSH和AsA的含量，有效缓解盐胁迫对杜梨叶片的过氧化伤害，其中以10 μmol/L CaCl2处理效果最为显著。说明NaCl处理可对杜梨叶片造成氧化伤害，施加低浓度（5～10 μmol/L）CaCl2处理可缓解盐胁迫对杜梨叶片抗氧化系统的影响。 　　关键词：杜梨；钙；盐胁迫；活性氧；抗氧化酶 　　中图分类号： S661.201文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）06-0245-03 　　收稿日期：2015-04-23 　　基金项目：国家自然科学基金（编号；江苏省农业科技自主创新资金[编号：CX（14）5018]。 　　作者简介：韩金龙（1989―），男，山西霍州人，硕士研究生，主要从事果树逆境生理和分子生物学研究。E-mail：hjlong24@126.com。 　　通信作者：常有宏，研究员，硕士生导师，主要从事果树育种和栽培生理研究。E-mail：cyh@。土壤盐渍化是影响农业生产与生态环境的一个重要因素。据不完全统计，世界上约有10亿hm2盐渍地，我国约占其中的3.75%，并且每年随着次生盐渍地的扩张，对我国的农业生产造成严重威胁[1]。植物在盐胁迫下最直接的影响就是抑制其生长，严重时会造成渗透胁迫和离子胁迫，破坏其细胞结构和功能，甚至导致其死亡[2]。因此，如何更好地利用开发盐渍地资源，已成为人们探讨的热点。而近些年，人们通过对外源缓冲剂研究的深入，已将其视为提高植物缓解盐胁迫的重要手段。 　　钙（calcium，Ca）是植物生长发育所必需的一种大量元素，在植物体内起着极其特殊的作用。它不仅能够维持细胞壁、细胞膜和膜结合蛋白的稳定性，参与调节无机离子运输，而且作为细胞内第二信使，能够将胞外信息传递给胞内，从而引起一系列的生理生化变化。目前研究发现，当植物受到逆境胁迫时，植物体细胞内的游离钙离子浓度会上升，并通过Ca2+与CaM结合，形成Ca2+-CaM复合体，再对逆境胁迫信号的感受、传递和响应，启动一系列生理生化过程，以适应外界环境[3]。同时，外源施加钙也能提高植物的抗寒性[4]、抗热性[5]和抗盐性[6]等多种抗性。本试验对盐胁迫下施加不同浓度钙离子，分析其对杜梨叶片抗氧化系统的影响，旨在为缓解梨树盐胁迫提供理论依据。 　　梨是世界及我国主栽果树之一。随着土壤盐渍化程度的不断加剧，严重限制了梨产业的发展。梨树主要靠嫁接来繁殖，选择抗性强的砧木对嫁接苗的生长至关重要。杜梨（Pyrus betulaefolia Bunge）原产于中国，将其作为嫁接苗的砧木，能够提高梨树的耐盐能力[7-8]。杜梨在盐胁迫下，通过减少Na+在根中积累和向地上部运输来适应逆境[9-10]，但在高盐胁迫下，植物仍能受到氧化胁迫等伤害[11]。本试验对盐胁迫下施加不同浓度钙离子，分析其对杜梨叶片抗氧化系统的影响，旨在为缓解梨树盐胁迫提供理论依据。 　　1材料与方法 　　1.1植物材料培养和处理 　　将杜梨种子埋在湿沙中至于4 ℃温度中，经3个月的低温处理后，将有胚根幼苗移植于水培系统中（培养液为Hoagland 营养液，pH值5.8），并放置于光照培养箱中，每3 d更换1次培养液。培养条件如下：光照周期16 h/8 h（光照/黑暗），光照强度300 μmol/（m2?s），培养温度（25 ± 0.5） ℃，空气相对湿度60%～70%。待植株长至8叶1心时，选择长势一致的健壮幼苗，并用蒸馏水冲洗干净，用含 200 mmol/L NaCl的Hoagland 营养液进行处理，并添加一定浓度的CaCl2母液，使其在水培系统中的浓度达到 0、5、10、50、100 μmol/L。以生长在不含NaCl和CaCl2的Hoagland 营养液中的植株作为对照。每个处理设3次重复，处理3 d后收集杜梨叶片，用于测定各种生理指标。 　　1.2测定