针刺百会大椎对老年性痴呆大鼠脑内AChE影响.docVIP

针刺百会大椎对老年性痴呆大鼠脑内AChE影响 　　[摘要] 目的：探讨针刺百会、大椎对老年性痴呆大鼠的乙酰胆碱酯酶（AChE）含量的影响。方法：选用纯系Wistar老年大鼠52只，随机分为假手术组、模型组、针刺组和西药组，采用β-淀粉样蛋白向海马CA1区定向注射制作老年性痴呆模型，进行百会、大椎针刺治疗。检测大鼠脑内AChE的含量。结果：针刺老年性痴呆大鼠的百会、大椎穴，可降低脑组织内AChE的含量，与模型组比较，差异有统计学意义（P0.05）。结论：针刺能提高老年性痴呆大鼠的学习记忆能力，改善自由基代谢，促进老年性痴呆大鼠的智能恢复。 　　[关键词] 针刺疗法；老年性痴呆；乙酰胆碱酯酶 　　[中图分类号] R749.1 [文献标识码] A[文章编号]1673-7210（2009）06（b）-077-02 　　 　　阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD）是老年人最常见的神经变性疾病，以记忆障碍和其他认知功能障碍为主要临床表现，多以患者的海马和新皮层胆碱乙酰转移酶及乙酰胆碱（ACh）显著减少为特点，其病因尚不清楚。AD的发病率随年龄增高而增高，65岁以上患病率约为6%。近10年来国内外关于AD的研究进展很快，本研究采用颅内注射法进行实验研究，并针刺百会、大椎穴，以期找到治疗AD的更好方法[2]。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物 　　选用纯系健康Wistar雄性大鼠52只，18～20月龄，体重（500±20） g，由黑龙江中医大学实验动物中心提供。 　　1.2 仪器与试剂 　　脑立体定位仪（NARISHIGE SN-2型），电动离心机（北京医用离心机厂 LD5-2型），电热恒温水浴箱（江苏省金坛市医疗仪器厂 RF-540型），电热恒温培养箱（中国厦门医疗电子仪器厂 HWB-2型），电动玻璃匀浆机（宁波新芝科学仪器研究所DY89-1型），分析振荡器（江苏泰县医疗器械厂FZQ-2型），托盘式扭力天平（上海第二天平仪器厂 TN-100B型），722光栅分光光度计（上海第二分析仪器厂）。乙酰胆碱酯酶（AChE）试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。 　　1.3 方法 　　1.3.1 老年性痴呆模型的建立采用颅内注射法。52只Wistar大鼠，随机分为假手术组、模型组、西药组和针刺组，每组13只。针刺组、西药组和模型组大鼠术前12 h禁食、禁水，以20%乌拉坦(0.55 ml/kg)腹膜注射麻醉后，待角膜反射和肌张力消失后，将大鼠固定在脑立体定位仪上,按脑立体定位图谱(AP=2.22 mm，ML=3.0 mm，DV=2.8 mm)，用手摇牙科钻钻开颅骨，用微量进样器，向海马内注射1 μl孵育好的β-淀粉样蛋白（β-AP）[3]。5 min内注射完毕，留针5 min后缓缓起针，牙科泥封好颅骨，撒消炎粉，缝合，放入笼中常规饲养。术后每只每天肌肉注射青霉素20×105 U，连续3 d ,以预防感染。假手术组麻醉后，注射等量的生理盐水，缝合后放入笼中，并肌肉注射青霉素以预防感染。 　　1.3.2 实验方法7 d伤口完全愈合后，饮食正常，无肢体残疾，即开始治疗。针刺组用30号40 mm毫针，于模型大鼠头部百会、大椎穴（参照林文注等编著的《实验针灸学》）捻入0.5寸，并持续捻针5 min，而后留针20 min。持续治疗1个月。西药组给予实验浓度为40 mg/ml 的吡拉西坦（脑复康）生理盐水溶液，每天1次灌胃，剂量每次6 ml/kg次，共30 d。模型组和假手术组均给予等量生理盐水灌胃。 　　1.3.3AChE的检测行为学测试后，断头取一侧脑组织，冰生理盐水冲洗后，称重匀浆，按照试剂盒说明，检测AChE的含量。 　　1.4统计学处理 　　计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验。 　　2结果 　　模型组与假手术组比较，AChE含量明显升高（P0.001），提示造模成功。针刺组、西药组与模型组比较，AChE含量明显降低（P0.05）。见表1。 　　 　　表1 各组大鼠术后脑组织AChE含量比较（x±s） 　　与模型组比较，1）P0.05；与假手术组比较，2）P0.001 　　 　　3讨论 　　针刺百会、大椎能提高老年性痴呆大鼠的学习记忆能力，经临床验证，针灸疗法对AD的智能及社会活动功能康复有积极作用，其疗效肯定。针灸单穴及复方治疗本病在古代文献已有记载。《难经?二十八难》云：“督脉者……上致风府，入属于脑。”百会和大椎均属督脉穴位，百会为“三阳五会”，大椎为“诸阳之会”，为手足诸阳之会。督脉与脑密切相关，督脉通于脑。中医学认为脑为髓海，其气血上冲于盖（百会），下在风府。针刺此二穴可以激发经气，疏通经络，使脑髓得气血之荣养而复聪。周莉[4]亦观察到针刺百会可提高人的及时记忆能