卵泡刺激素剂量依赖性表达基因的筛选.PDFVIP

浙江大学学报（农业与生命科学版） 44（2）：162～171，2018 JournalofZhejiangUniversity(Agric.LifeSci.) /agr E-mail:zdxbnsb@ DOI:10.3785/j.issn.1008-9209.2018.03.014 卵泡刺激素剂量依赖性表达基因的筛选 1 2 2 2 2 2 1* 2,3*1 刘甜 ，陈晓宇 ，朱志伟 ，于福先 ，黄菁 ，贾若欣 ，石放雄 ，潘建治 （1.南京农业大学动物科技学院，南京210095 ；2.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所，杭州310021 ； 3.浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所，杭州310021） 摘要 为开发能高效检测卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone, FSH）制品生物活性的新方法，选取猪卵泡颗粒 细胞，利用转录组测序技术对比FSH 处理组（40 mIU/mL ）和空白对照组细胞中基因的表达情况，分析并获得大量 受FSH 调控的候选基因，运用荧光定量聚合酶链式反应验证FSH 处理后显著上调的基因，并进一步利用FSH 浓度 梯度（0、20 、40 、60、80、100 mIU/mL ）处理卵泡颗粒细胞。结果显示，基因OLR1、LHCGR 、SCARA5 和S100A 12 的表 达量呈现FSH 浓度依赖性升高。在3 倍递增的FSH 浓度梯度（0、1、3、9、27 、81、243 、729 mIU/mL ）下观察各基因表 2 达量的变化，发现在0~243 mIU/mL 的FSH 浓度范围内，LHCGR 基因的表达量与FSH 浓度呈高度线性相关（R = 0.982）。因此，可通过检测FSH 刺激条件下细胞中LHCGR 基因的表达量，来评估FSH 制品的生物学效价。 关键词 卵泡刺激素；卵巢颗粒细胞；生物学效价；猪 中图分类号 S 814.8；S 828 文献标志码 A Screening of follicle-stimulating hormone dose-dependent expression genes. Journal of Zhejiang University (Agric. Life Sci.), 2018,44(2): 162-171 1 2 2 2 2 2 1* LIU Tian , CHEN Xiaoyu , ZHU Zhiwei , YU Fuxian , HUANG Jing , JIA Ruoxin , SHI Fangxiong , PAN Jianzhi2,3* (1. College of Animal Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China; 2. Institute of Animal Husbandry and Veterinary Science, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310021, China; 3. Institute of Virology and Biotechnology, Zhejiang Acad