靶向结缔组织生长因子siRNA对于肝星状细胞介导肝纤维化研究进展.docVIP

靶向结缔组织生长因子siRNA对于肝星状细胞介导肝纤维化研究进展 　　[摘要]　肝纤维化是多种慢性因素导致肝内细胞发生持续、反复的坏死或炎症刺激，机体发生的修复反应，以肝内细胞外基质（extracellular　matrix，ECM）过度沉积和肝星状细胞（hepatic　stellate　cells，HSC）活化为特征。它不是一个独立的疾病，而是许多慢性肝病的共同病理过程，持续进展可导致肝内正常组织结构改建形成肝硬化并出现多种危及生命的并发症，预后极差。由于体内存在纤维降解过程，故肝纤维化逆转可以避免病情进展至肝硬化。研究表明靶向结缔组织生长因子（connective　tissue　growth　factor，CTGF）小干扰RNA（small　interfering　RNA，siRNA）可能抑制HSC活化、增殖及ECM的合成，使肝纤维化进程受阻。siRNA介导的CTGF基因沉默为肝纤维化治疗开辟了新的途径。 　　[关键词]　结缔组织生长因子；小干扰RNA；肝星状细胞；肝纤维化 　　[中图分类号]　R735 [文献标识码]　A [文章编号]　1673-7210（2012）12（b）-0058-03 　　肝纤维化是在多种细胞因子如靶向结缔组织生长因子（connective　tissue　growth　factor，CTGF）等作用下、各种慢性肝病进展至肝硬化的共同通路。在此过程中，肝星状细胞（hepatic　stellate　cells，HSC）活化并分泌细胞外基质（extracellular　matrix，ECM）为重要病理生理基础。因此，减少HSC活化、促进ECM降解可逆转肝纤维化。有研究表明，siRNA靶向干扰HSC的CTGF基因表达为肝纤维化治疗开辟了新的途径。现将HSC、CTGF及siRNA与肝纤维化的研究进展综述如下： 　　1　HSC 　　1.1　HSC概念及作用 　　对HSC的研究已有100　多年的历史。1876年德国学者Kupffer首先用氯化金染色确认出HSC，称之为sternzellen，1971年Wake再次应用氯化金染色证明Ito细胞即Kupffer所说的sternzellen[1]。HSC是功能多样的肝内非实质细胞，故被命名为Ito细胞、贮脂细胞、窦周细胞、脂细胞、间质细胞或维生素A储存细胞等[2]。 　　HSC大小介于肝细胞与库普弗细胞（kupffer　cell，KC）之间，中央带较少，大多数排列于肝小叶的周围，主要特点为形态不规则，胞体常延伸出形态各异的胞突包绕肝血窦，邻近的HSC主要也是由延伸出的胞突相连接[3]。正常肝脏肝星状细胞占肝内细胞总数的5%～15%，其主要功能是储存维生素A、合成和分泌多种胶原酶和少量的ECM、释放转移生长因子β（transfer　growth　factor-β，TGF-β）及肝细胞生长因子（hepatocyte　growth　factor，HGF），并参与肝脏的物质代谢[4]。由于其细胞形态的可塑性及在立体空间的分布使其在调节肝血窦血流方面发挥重要作用[5]。 　　1.2　HSC活化 　　HSC活化是肝纤维化的病理变化中的重要事件[6-7]。在各种因素的刺激下，静止的HSC活化、产生形态变化，由富含维生素A的状态脱颗粒释放出维生素A，这一过程称为HSC的活化[4]。活化包括启动及持续两个阶段。前者指早期在基因表达改变及细胞因子等刺激作用下细胞表型发生改变，由旁分泌机制参与；后者则是这些刺激因素维持HSC的活化表型，导致肝纤维化形成，既有旁分泌机制参与又有自分泌机制参与[8]。在启动激活阶段，在肝脏受到损伤后，HSC附近细胞如肝细胞、血小板、Kupffer细胞、血管内皮细胞、浸润癌细胞等在旁分泌机制的作用参与下，释放出一系列细胞因子，从而完成激活。活化的HSC具有以下生物学特征：①形态类似肌纤维母细胞；②增殖活性明显增强；③胞质中脂滴、维生素A　减少或消失；④表达a-SMA（a-smooth　muscle　actin，a-SMA）、波形蛋白及结合蛋白等；⑤分泌ECM增加；⑥基质金属蛋白酶组织抑制剂（tissue　inhibitor　of　metalloproteinase，TIMP）合成和分泌增加；⑦收缩性增强等。大多数研究显示，活化HSC主要以凋亡的方式消除，此为肝纤维化消退的主要机制[4]。 　　1.3　HSC与肝纤维化 　　肝纤维化是一种以ECM沉积为特点的可逆的肝损伤修复反应[9]。在受损肝脏中，HSC是ECM的主要来源[10]。随着各种因素进一步作用在肝脏，激活的HSC由复杂的旁分泌与自分泌作用合成并分泌ECM，大量的基质金属蛋白酶抑制剂抑制胶原酶、明胶酶等合成、释放，ECM　降解速率下降使ECM降解小于合成，最终导致ECM在肝内过度