生物碱类生物碱alkaloid是一类存在于生物界主要是植物中大多具.PPTVIP

香豆素类化合物的鉴别 鉴别 - 2.显色反应 Emerson反应 ＋ [O] K3Fe(CN)6 4-氨基安替比林 红色 样品的乙醇溶液底价在滤纸上，喷2% 4-氨基安替比林乙醇溶液，再喷8％铁氰化钾水溶液，即显色，放入密闭氨气缸内，则呈橙红至深红色。 香豆素类化合物的鉴别 鉴别 - 2.显色反应 香豆素内酯环在碱性条件下开环，与盐酸羟胺试剂缩合成异羟肟酸，再于酸性条件下与三价铁离子络合成盐而显红色。酯、内酯、酸酐均呈正反应。 内酯环的鉴别反应-异羟肟酸铁反应 香豆素类化合物的鉴别 鉴别 - 2.显色反应 异羟肟酸衍生物 红色 OH－ HONH2·HCl Fe3+ H+ 异羟肟酸铁衍生物 取样品的醇溶液1mL，加新鲜的1mol/L盐酸羟胺醇溶液0.5mL、6mol/L氢氧化钾醇溶液0.2mL，加热至沸，冷后加5％盐酸酸化，然后滴加 1％三氯化铁溶液1～2滴，出现紫红色表示有香豆素类化合物。 异羟肟酸铁反应 香豆素类化合物的鉴别 鉴别 - 3.色谱鉴别 最常用的吸附剂是硅胶，而纤维素和中性氧化铝较少采用。 由于香豆素化合物常显中性或弱酸性，故展开剂多为中等极性的pH值为中性或微酸性混合试剂。 简单香豆素：甲苯-甲酸乙酯-甲酸（5:4:1） 苯-丙酮（9:1） 呋喃香豆素：正丁烷-乙酸乙酯（7:3） 石油醚-二氧六环（5:1）或氯仿 香豆素苷类：正丁醇-醋酸-水（4:1:5） 薄层色谱法 香豆素类化合物的鉴别 鉴别 - 3.色谱鉴别 香豆素纸色谱法常用展开剂为水饱和的正丁醇或氯仿等。 含羟基香豆素选用酸性展开剂，避免中性展开剂拖尾，碱性展开剂则因成盐而使Rf值偏小。 呋喃香豆素亲脂性较大，用二甲基甲酰胺为固定相，用己烷-苯（8:2）为展开剂。 含邻二酚羟基或香豆素苷类可先将色谱纸用0.5%硼砂溶液处理，再用0.5%硼砂溶液饱和的正丁醇为展开剂。 纸色谱法 香豆素类化合物的鉴别 鉴别 - 3.色谱鉴别 紫外光下观察斑点： 含羟基香豆素有较强的荧光，呋喃香豆素类荧光较弱，用氨气熏或喷10％氢氧化钾醇液，可使荧光增强。常可见蓝、棕、绿、黄色的荧光。 常用显色剂 三氯化铁试剂：显绿、蓝、棕、红等色； 重氮试剂：显红、紫色； 异羟肟酸铁试剂：显红色； Emerson试剂：显深红或橙红色； Gibb’s试剂：显蓝色。 色谱显色 鉴别实例 －秦皮 秦皮为木犀科多种白蜡树属植物的杆皮或枝皮，主要有效成分为七叶内酯和七叶苷。 七叶内酯 R＝H 七叶苷 R＝glc 香豆素类化合物的波谱鉴别 红外光谱（IR） 母核：内酯1750～1700cm－1最强峰，1270～1220cm －1 ，1100～1000cm －1强吸收。 芳环：1660～1600cm －1 有三个较强吸收。 判断呋喃环：C-H在3175～3025cm －1 有较弱小但非常尖锐的吸收峰。 香豆素类化合物的波谱鉴别 紫外光谱（UV） 苯环：274nm （lg Σ 4.03） 。 α-吡喃酮：311nm （lg Σ 3.72） 含氧取代：红移，如7-含氧取代，有217nm及315～325nm强吸收峰（lg Σ 4）。 含酚羟基者在OH－中：红移，Σ增强。 香豆素类化合物的波谱鉴别 核磁共振谱（NMR） 母核的13C-NMR特征 C δ 分析 C-2(羰基碳) 160.0 含氧基、苯环、羰基共轭影响 C-7(含氧取代) C-3（无取代） 110.0～113.0 无取代，且受苯环影响 C-4（无取代） 143.0～145.0 C-9（季碳） 149.0～154.0 C-10（季碳） 110.0～113.0 定量分析 荧光分光光度法 TLC-SCAN UV GC HPLC 分光光度法 香豆素在紫外光的照射下显蓝色荧光，可作为定性鉴别和定量测定的依据。 香豆素类化合物羟基和芳环形成的共轭体系具较强的紫外特征吸收，不同的香豆素类化合物在不同 pH 条件下表现出不同的光谱特征，因此可用紫外 - 可见分光光度法测定生药中总香豆素的含量。 　　蛇床子中香豆素类成分的气相色谱分析 　　　　色谱柱： DB 2 1 石英毛细管柱 (25m × 0 . 32mm ， 0 . 53 m m ) ； 进样口温度： 280 ℃ ； 氢火焰离子检测器 ， 检测器温度 350 ℃ ； 二阶程序升温 ， 起始温度 190 ℃ (20 min) ， 升温速率 1 ： 10 ℃/ min ， 终温 1 ： 240 ℃ (10 min) ； 升温速率 2 ： 15 ℃/ min ， 终温 2 ： 280 ℃/ mi