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高温胁迫对山杏幼苗丙二醛和脯氨酸指标变化影响
高温胁迫对山杏幼苗丙二醛和脯氨酸指标变化影响
摘要:以山杏为试验材料,模拟高温胁迫对山杏幼苗叶片丙二醛含量和脯氨酸含量的影响。结果表明:在模拟高温胁迫条件下,丙二醛和脯氨酸均出现了不同程度的上升,叶片内丙二醛含量和游离脯氨酸酶含量与胁迫温度和时间呈正相关,其中模拟高温胁迫最严重的试验组(40 ℃)叶片丙二醛和脯氨酸增加最为明显。
关键词:高温胁迫;丙二醛;脯氨酸
中图分类号:S662.2文献标识码:ADOI编码:10.3969/j.issn.1006-6500.2013.04.024
Effects of High Temperature Stress on MDA and Pro Indexes of Siberian Apricot
XU Jia-lin
(Shanxi Zhongtiao Mountain State Forestry Administration, Houma, Shanxi 043003, China)
Abstract: Taking siberian apricot as the experimental material, simulated the effects of high temperature stress on the content of MDA and proline content in leaves of siberian apricot . The results showed that in the simulated under high temperature stress, MDA and proline than in the control group showed varying degrees of increase, the content of MDA in leaves and free Pro content was positively correlated with stress, temperature and time, the simulation of high temperature stress in experimental group, the most serious ( 40 ℃) MDA and proline increased the most obvious.
Key words: high temperature stress ; MDA; Pro
1材料和方法
1.1材 料
材料选择生长健康、长势一致的一年生山杏幼苗,在恒温情况下培育1个月后,分为4组,分别为对照组、一组、二组、三组,并将4个组分别在不同温度下胁迫72 h,对照组(25 ℃),一组(30 ℃),二组(35 ℃),三组(40 ℃)。
1.2方 法
1.2.1丙二醛(MDA)含量测定采用三氯乙酸-硫代巴比妥酸法,取植株上一定叶位的叶片,剪成小段,混匀, 称取0.4 g加入2 mL 0.1%氯乙酸(TCA研磨成匀浆,再加入3 mL 0.1% TCA,分两次冲洗研钵,合并提取液,放入试管中。提取液中加入5 mL 0.5%硫代巴比妥酸(TB/X)溶液,摇匀。将试管放入沸水浴中煮沸10 min(有气泡产生开始记时)后,立即将试管取出放入冷水浴中冷却,离心,取上清液并量体积。以0.5%硫代巴比妥酸溶液为空白,在722型分光光度计532 nm、600 nm波长处测定其吸光值。
依公式计算:MDA含量(mmol?g-1)=△AN/155W
式中,△A: A532和A600的差;N:上清液总体积(mL); W:鲜样品质量(g);155:1 mmol三甲川在532nm的吸光系数。
1.2.2脯氨酸含量测定采用酸性茚三酮法,分别称取高温处理后的植物叶片0.1 g加入5 mL磺基水扬酸研磨成匀浆,沸水浴浸提10 min,冷却后装入5 mL离心管,3 000 r?min-1的转速离心10 min。取2 mL上清液加入2 mL冰醋酸和3 mL酸性茚三酮显色液,摇匀,沸水浴40 min,冷却至室温;加入4 mL甲苯,充分摇匀,以萃取红色产物。萃取后避光静置。完全分层后,吸管吸取甲苯层,用722型分光光度计于520 nm波长下测定吸光度。
游离脯氨酸含量(μg?g-1)=(C×V)/(W×A×100)
式中,C:从标准曲线上查得脯氨酸微克数;V:提取液总体积(mL);A:测定时加样量(mL); W:样品干质量(g)。
2结果与分析
2.1高温胁迫对山杏叶片中丙二醛(MDA)含量的影响
丙二醛(MDA ) 是膜脂过氧化的产物,通常用丙二醛含量的多少作为膜脂
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