微生物法提取马齿苋与银杏叶黄酮及其抗氧化活性研究.docVIP

微生物法提取马齿苋与银杏叶黄酮及其抗氧化活性研究 　　摘要：采用乙醇和微生物的方法对马齿苋（Portulaca oleracea L.）和银杏（Ginkgo biloba L.）叶进行黄酮的提取，并测定粗提液对DPPH自由基的清除作用。结果表明，乙醇提取马齿苋和银杏叶黄酮的提取率分别为2.00%和4.37%，微生物提取马齿苋和银杏叶黄酮的提取率分别为2.07%和4.84%。马齿苋和银杏叶微生物提取液对DPPH自由基的清除作用在相同的稀释倍数下高于乙醇提取液，表明微生物提取植物中黄酮具有一定的可行性和优越性。 　　关键词：马齿苋（Portulaca oleracea L.）；银杏（Ginkgo biloba L.）叶；黄酮；微生物；DPPH自由基 　　中图分类号：TQ234.2；R284.2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）06-1455-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.06.044 　　Abstract： Ethanol method and microbiological method were used to extract flavonoids from purslane and Ginkgo biloba. DPPH radical scavenging effect of crude extraction was measured. The results showed that the rate of flavonids extracted from Ginkgo and purslane with ethanol method was 2.00% and 4.37%. That from purslane and Ginkgo biloba with microbial method was 2.07% and 4.84%. Scavenging of DPPH radicals of microbial extract at the same dilution factor was higher than that of ethanol extract， indicating that microbiologial method of extracting the flavonoids from plants had certain feasibility and superiority. 　　Key words： Portulaca oleracea L.；leaves of Ginkgo biloba L.；flavonoids； microorganism； DPPH 　　植物活性成分包括黄酮、多酚、生物碱、皂苷等，广泛存在于植物的叶、根、茎、果实中，是综合利用的植物资源。植物活性成分具有抗氧化、抗菌、预防或抑制肿瘤等生理功能。植物活性成分因其高的安全性，已渗入到食品、医药、化妆品等行业[1，2]。因此，利用各种提取技术从植物中提取具有高活性的成分已经成为目前的研究热点。传统的提取技术包括有机溶剂提取法、热水提取法、系统溶剂提取法等，但产品安全性低、耗时长、提取率低。安全性高、提取率高和环保的新型提取方法越来越受人们的关注。微生物法提取植物活性成分是利用微生物在生长过程中分泌的多种酶，从而对植物中的活性成分进行提取和修饰[3-7]。 　　本研究以2种提取黄酮较为普遍的马齿苋（Portulaca oleracea L.）和银杏（Ginkgo biloba L.）叶为对象，以乙醇提取和微生物提取作为对比，检测提取液中总黄酮的含量和提取液对DPPH自由基的清除作用，初步探究微生物法提取植物中黄酮的可行性与优越性。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料与仪器 　　1.1.1 菌种 黄酒酵母，购自北京市食品酿造研究所。 　　1.1.2 供试材料 马齿苋、银杏叶，60 ℃烘干至恒重，粉碎过50目筛备用。 　　1.1.3 试剂 芦丁标准品（生化试剂，中国药品生物制品检定所）；DPPH（1，1-二苯基-2-三硝基苯肼）购自美国Sigma公司；无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠均为市售国产分析纯。 　　1.1.4 仪器 高压灭菌锅（上海申安医疗机械厂）、全温度振荡培养箱（太仓华美生化仪器厂）、水浴恒温摇床（太仓华美生化仪器厂）、低速大容量台式离心机、紫外分光光度计UV-1240（日本岛津）等。 　　1.2 黄酮的提取 　　1.2.1 乙醇提取黄酮 分别称取5 g马齿苋和银杏叶粉末，按照1∶50料液比（g∶mL，下同）， 加入体积分数为60%的乙醇250 mL，于70 ℃水浴摇床中提取3 h，冷却后4 000