冬虫夏草素对小鼠脑缺血复灌损伤的保护作用及机制研究-药理学专业论文.docxVIP

中文摘要 第一部分:冬虫夏草素对小鼠脑缺血复灌损伤的 保护作用及机制研究 目的： 研究冬虫夏草素对小鼠脑缺血复灌损伤的保护作用并探讨其作用机制。 方法： 采用出生后 6-8 周健康成年雄性昆明种小鼠，随机分为 4 组(每组 8 只)：假手术 组、模型组、冬虫夏草素低剂量组（10mg/kg）、冬虫夏草素高剂量组（20mg/kg）。冬 虫夏草素组小鼠灌胃给药(0.1ml/10g 体重），假手术组、模型组小鼠灌胃给双蒸水 （0.1ml/10g 体重），每天灌胃一次，连续给药七天后，小鼠用 10%水合氯醛（350mg/kg） 腹腔麻醉后行双侧颈总动脉结扎，缺血 15 分钟后复灌 4 小时，建立缺血复灌损伤模 型。 结果： 1．冬虫夏草素对小鼠缺血复灌损伤后大脑皮层以及海马神经细胞的形态 学影响：小鼠双侧颈总动脉结扎（2VO）缺血 15 分钟复灌 4 小时后,可见模型组小 鼠大脑皮层以及海马 CA1 区神经细胞明显损伤，如细胞核浓缩、核碎裂、核消失、 细胞深染等现象， 正常神经细胞数目显著减少（与假手术组相比 p0.01，n=5）。冬 虫夏草素（10mg/kg）预处理后则明显减轻大脑皮层以及海马 CA1 区神经细胞损伤状 况，神经细胞丢失数目显著减少（与模型组相比 p0.05，n=5）。2.冬虫夏草素对小 鼠缺血复灌损伤后大脑脂质过氧化程度的影响：假手术组 SOD 活力、MDA 水平分别为 93.54 ± 12.94 (U/mg. protein)（n=8）、1.83 ± 0.44 (nM/mg. protein)（n=8）。 缺血 15 分钟复灌 4 小时后，脑组织内 SOD 活力降低 48.5%（与假手术组相比 p0.01， n=8）。MDA 水平升高 65.9%（与假手术组相比 p0.01，n=8）。冬虫夏草素（10mg/kg） 预处理后则明显减轻大脑脂质过氧化程度，脑组织内 SOD 活力明显升高（与模型组  相比 p0.05，n=8）。MDA 水平明显降低（与模型组相比 p0.05，n=8）。3. 冬虫夏 草素对小鼠缺血复灌损伤后脑内氨基酸神经递质的影响: 缺血 15 分钟复灌 4 小时后,小鼠大脑内五种氨基酸的含量明显增加,增加比例如下:天冬 氨酸(144%), 谷氨酸(117%),甘氨酸(328%),牛磺酸(121%), γ 氨基丁酸(86%)（与假手术 组相比 p0.05，n=8）。冬虫夏草素（10mg/kg）预处理后则明显减少大脑内五种氨基 酸的含量。降低比例如下：天冬氨酸(39%)、谷氨酸(28%),甘氨酸(60%),???磺酸(23%), γ 氨基丁酸(36%)（与模型组相比 p0.05，n=8）。 4. 冬虫夏草素对小鼠缺血复灌损伤后脑内基质金属蛋白酶 3 的影响： 小鼠脑缺血 15 分钟复灌 4 小时后，脑组织内基质金属蛋白酶-3 表达增加 191.5% （与假手术组相比 p0.01，n=8）。冬虫夏草素（10mg/kg）预处理后则明显减少大脑 基质金属蛋白酶-3 表达，降低 45.8%（与模型组相比 p0.05，n=8）。 5. 冬虫夏草素对小鼠缺血复灌损伤后大脑皮层及海马各区 NF-КB 表达 的影响 各组小鼠 CA1 区 IKKα（IКB-kinase-α）的荧光密度（均值±标准差）：假手术组 67.66±8.72；模型组 117.08±21.41；冬虫夏草素（10mg/kg）组为 89.58±11.32；各组小 鼠 CA1 区 P65（是 NF-КB 的一种主要亚基，也称为 RelA）的荧光密度（均值±标准 差）：假手术组 63.53±8.94；模型组 164.72±19.03；给药组 118.29±11.76。经 SPSS13.0 软件统计处理，模型组与假手术组荧光密度相比有极显著性差异（P0.01）; 冬虫夏 草素（10mg/kg）组与模型组荧光密度相比有显著性差异（P0.05）。 结论： 1. 冬虫夏草素（10mg/kg）对小鼠脑缺血复灌损伤具有明显的保护作用，其作用 可能与降低脑缺血复灌后脂质过氧化程度，减少细胞外谷氨酸、天冬氨酸等兴奋性氨 基酸含量，以及抑制细胞内基质金属蛋白酶-3 的激活有关。2. 冬虫夏草素在较高剂量 组（20mg/kg）对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用不明显，其机制有待进一步研究。 关键词：缺血复灌，超氧化物歧化酶，丙二醛, 谷氨酸, 基质金属蛋白酶-3  中文摘要 第二部分:冬虫夏草素对小鼠全脑脑片氧糖剥夺复氧损伤的 保护作用及机制研究 目的： 研究冬虫夏草素对小鼠脑缺血复灌损伤的保护作用并探讨其作用机制。 方法： 出生后(6-8 周)健康成年雄性小鼠随机分为 5 组(每组 8 只)：正常组、OGD 模型组、 冬虫夏草素组(20μМ、40μМ、80μМ），各组