动物源性食品中类固醇激素残留的检测方法分析-分析化学专业论文.docxVIP

河北大学 学位论文独创性声明 本人郑重声明 : 所呈交的学位论文 ，是本人在导师指导下进行的研究工作及取得 的研究成果。尽我所知， 除了文中特别加以标注和致谢的地方外 ，论文巾不包含其他 人己经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得河北大学或其他教育机构的学位或证书 所使用过的材料。与我 一 同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确 的说明并表示了致谢。 作者签名: 象左右 日期:半lL年 b 月 J 问 学位论文使用授权声明 本人完全了解河北大学有关保留、使用学位论文的规定，即 :学校有权保留并向国 家有关部门或机构送交论文 的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布 论文的全部或部分 内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 本学位论文属于 l、保密口，在 年一一一月一一_R 解密后适用本授权声明 。 2、不保密团/。 (请在以上相应方格内打 U .J )  保护知识产权声明 本人为申请河北大学学位所提交的题目为(动鹤教棋食品中类田德激素〉的学位 3是 flj#J拉冽万法有究 论文，是我个人在导师 I 奴隶指导并与导师合作下取得的研究成果，研究工作及取得 的研究成果是在河北大学所提供的研究经费及导师的研究经费资助下完成的。本人完全 了解并严格遵守中华人民共和国为保护知识产权所制定的各项法律、行政法规以及河北 大学的相关规定。 本人声明如下:本论文的成果归河北大学所有，未经征得指导教师和河北大学的书 面同意和授权，本人保证不以任何形式公开和传播科研成果 和科研工作内容。如果违反 本声明 ，本人愿意承担相应法律责任。 声明人 :如苟 明:半L年 月 J 日 作者签名 : jL 昨 日期:主L年_6_ .8 I R 导师签名: 么LP 明旦L吐月J  第1章 概 述 1.1 类固醇激素概述 类固醇激素具有强且持久的蛋白同化作用，可以促进动物超常态生长，大幅提高动 物养殖经济效益，在养殖业中被大量使用。滥用该类激素会造成其在动物组织中不同程 度的残留，导致机体代谢紊乱、发育异常或潜在致癌、致畸风险。 糖皮质激素为类固醇激素中的一类。在医学上可用于治疗过敏、哮喘等疾病。合成 糖皮质激素如倍他米松、地塞米松等，具有很强的抗炎作用[1]。在兽医中被广泛用于治 疗呼吸道、胃肠疾病等。这些药物在人体机能内能产生毒副作用。欧盟通过欧洲共同体 委员会指令 96/22/EC禁止其违法用为促生长剂[2]。 雌激素是由卵巢分泌的一类类固醇激素。雌激素通过食物链进入人体后会扰乱体内 激素平衡，影响生殖系统、神经系统，诱发乳腺癌、卵巢癌等疾病[3,4]。1996 年欧盟明 令禁止使用具有促生长作用的激素[2,5]。《中华人民共和国农业部公告第 235 号》也规定 了已烯雌酚及其盐为禁用药物。 畜牧业中滥用激素问题已经成为国内外关注的焦点问题。因此，世界各国对类固醇 类激素采取禁用或限量使用[5,6]。但是，食品中微量类固醇激素残留问题依然存在, 我国 在监测和抽查中多次在动物源性食品中检出违禁激素类药物残留，出口食品屡发贸易壁 垒事件。因此,开发具有高灵敏度、高选择性的激素残留检测技术, 对保证食品安全具 有重要意义。 1.2 类固醇激素类药物残留样品前处理 1.2.1 样品的提取和净化 对动物源性样品的前处理大多采用液-液提取和固相萃取方式[7-9]。牛奶或牛肉中糖 皮质激素残留用到固相萃取[10-13]和固相微萃取[14]。已有报道加速溶剂萃取用于牛肝中皮 质类固醇残留[15]，基质固相分散用于牛乳中地塞米松和泼尼松龙残留分析[16]。但是其对 类固醇等脂溶性较强目标物提取效率低、脂肪基质的净化困难，影响重现性和准确度， 存在回收率低与检测能力偏低等问题。 类固醇激素在动物体内以原型药物残留为主, 还有一部分以结合形式存在, 如葡 萄糖醛酸甙、硫酸酯等。酶解可促进水解成游离组分，降低提取过程中雌激素的损失。 报道的很多方法在提取前对样品进行酶解[10,11,17,18]，但缺点在于样品制备耗时，不能广 泛用于日常检验。 1.2.2 凝胶渗透色谱(GPC) 凝胶渗透色谱(GPC)是利用空间排阻的原理对样品进行分离，GPC 的柱子由化学惰性 的中空小球组成，详见图 1-1： 小分子通过填料“球”中的孔 大分子不能从孔中通过 图 1-1 凝胶渗透色谱（GPC）原理图 当样品进入凝胶色谱柱后，小分子化合物能从填料的孔中穿过，但大分子化合物不 能从孔中通过，只能穿过填料周围的空间，从而造成行程差距，小分子和大分子化合物 先后从柱中馏出，起到分离作用。 GPC 不受样品极性的影响，能有效去除生物源样品中含量较高的脂肪、蛋白、色素 等高分子量的干扰物。针对一般的兽药残