动脉粥样硬化兔模型中P-选择素的表达及褪黑素的干预作用内科学(血液病)专业论文.docxVIP

英文缩略词对照表(Abbreviation) 中文全名 英文全名 英文缩写 方差分析 analysis of variance ANOVA 动脉粥样硬化 atherosclerosis AS P-选择素 P-selelctin CD62P 3,3－二氨基联苯胺 diaminobenzidine DAB 纤维蛋白原 fibrinogen fg 颗粒膜蛋白 granular membrane protein GMP 高密度脂蛋白 high densityli poproteins HDL 苏木素－伊红 hematoxylin and eosin HE 辣根过氧化物酶 horseradish peroxidase HRP 低密度脂蛋白 low-density lipoproteins LDL 平均荧光强度 mean flourescence intensity MFI 褪黑素 melatonin MLT 血小板激活依赖性外 膜蛋白 platelet activation-dependent granule external membrane PADGEM 磷酸盐缓冲液 phosphate buffer saline PBS 多聚甲醛 Paraformaldehyde PFA 富血小板血浆 platelet-rich plasma PRP P-选择素糖蛋白配体 P-selectin glycoprotein ligand PSGL 标准差 standard deviation SD 总胆固醇 total cholesterol TCH 甘油三酯 Triglyceride TG 氧化型低密度脂蛋白 oxidized low density lipoprotein oxLDL 动脉粥样硬化兔模型中 P-选择素的表达 及褪黑素的干预作用 目的：动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是严重威胁人类健康的疾病之一，它 的形成和发展是一个慢性的过程。目前为止，其病因及发病机制未完全明了。有 研究表明P-选择素在其中起重要作用，P-选择素又名溶酶体膜蛋白CD62P(cluster of differentiation 62P,CD62P)，是一种高度糖基化的跨膜蛋白，属于黏附分子 家族的一员，是血小板活化的标志物，最早在活化的血小板上发现，最新的研究 发现在活化的内皮细胞上、动脉粥样斑块中都有一定程度的表达。其通过与细胞 表面的P-选择素配体结合，促进白细胞黏附、血栓形成等，促进AS的形成及疾病 进展。褪黑素(melatonin，MLT)主要是由松果体分泌的一种激素,近年来研究表明， MLT具有抗动脉粥样硬化形成作用，主要通过其抗氧化机制。对于褪黑素能否抑制 AS形成过程中P-选择素表达，国内外研究报道较少。基于此，本研究在建立兔动 脉粥样硬化模型的基础上，探索P-选择素与AS之间的关系和可能作用，并初步探 讨褪黑素对动脉粥样硬化形成过程中P-选择素的表达影响。 方法：首先建立高脂饮食诱导动脉粥样硬化兔模型，普通级新西兰大耳白兔 27 只， 随机分为三组：正常组、高脂组、褪黑素组。正常组给予标准饲料，高脂组和褪 黑素组均给予高脂饲料（由标准饲料、1%胆固醇、5%猪油组成）喂养，喂养 4 周 后，高脂组继续给予高脂饲料，褪黑素组给予褪黑素 5mg/kg/d 药物干预。12 周末 处死动物，采集血液，使用血脂检测试剂盒检测血脂水平；分离主动脉并用磷酸 盐缓冲液漂洗，其中一部分用常规方法固定、石蜡包埋、切片、苏木素-伊红染色 (hematoxylin and eosin,HE)、免疫组化；另一部分进行油红染色。HE 染色显微 镜下观察主动脉壁结构，免疫组织化学染色检测主动脉斑块 P-选择素的水平，流 式细胞术检测血小板表面 P-选择素的表达水平。 结果：成功建立了动脉粥样硬化兔模型；与正常组相比，高脂组在高脂喂养 12 周 后 血 清 总 胆 固 醇 (total cholesterol,TCH) 、 低 密 度 脂 蛋 白 (low-density lipoprotein,LDL) 、 甘 油 三 酯 (triglyceride,TG) 均 显 著 高 于 正 常 对 照 组 (P0.05)；而褪黑素组与高脂组相比，血清 TCH、LDL 水平显著下降(P＜0.05)， 相反高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)水平有所升高；提示褪黑素 能降低血清 TCH、TG 及 LDL，但对 HDL 不仅不降低，反而可能促进其生成。HE 染 色显