杜仲胶合成相关基因EuREF1克隆及表达分析-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

目录 HYPERLINK \l _bookmark0 摘要 1 HYPERLINK \l _bookmark1 Abstract 3 HYPERLINK \l _bookmark2 第一章 文献综述 5 HYPERLINK \l _bookmark3 1 杜仲胶的研究 6 HYPERLINK \l _bookmark4 1.1 杜仲胶的结构与性质6 HYPERLINK \l _bookmark5 1.2 杜仲胶的改性与应用 6 HYPERLINK \l _bookmark6 1.3 杜仲含胶细胞的形态及其分布 7 HYPERLINK \l _bookmark7 1.4 杜仲胶含量的动态变化规律7 HYPERLINK \l _bookmark8 1.5 提高杜仲胶含量的研究7 HYPERLINK \l _bookmark9 1.5.1 提高杜仲胶含量的传统方法 8 HYPERLINK \l _bookmark10 1.5.2 提高杜仲胶含量的基因工程方法8 HYPERLINK \l _bookmark11 2 杜仲胶合成相关基因研究概况 9 HYPERLINK \l _bookmark12 第二章 杜仲橡胶延长因子基因 EuREF1 克隆 13 HYPERLINK \l _bookmark13 1 材料 13 HYPERLINK \l _bookmark14 1.1 植物材料 13 HYPERLINK \l _bookmark15 1.2 主要试剂及培养基 13 HYPERLINK \l _bookmark16 1.3 主要仪器设备 14 HYPERLINK \l _bookmark17 2 方法 14 HYPERLINK \l _bookmark18 2.1 杜仲转录组信息筛选 14 HYPERLINK \l _bookmark19 2.2 杜仲叶、皮 RNA 的提取 15 HYPERLINK \l _bookmark20 2.3 cDNA 第一条链合成 16 HYPERLINK \l _bookmark21 2.4 5’-RACE 和 3’-RACE 扩增 17 HYPERLINK \l _bookmark22 2.5 扩增片段克隆及序列分析 19 HYPERLINK \l _bookmark23 3 结果与分析 21 HYPERLINK \l _bookmark24 3.1 转录组库中杜仲橡胶延长因子基因的筛选及引物合成 21 HYPERLINK \l _bookmark25 3.2 杜仲总 RNA 的提取 22 HYPERLINK \l _bookmark26 3.3 杜仲 EuREF1 基因克隆 22 HYPERLINK \l _bookmark27 3.4 蛋白 EuREF1 结构分析 24 HYPERLINK \l _bookmark28 4 讨论 27 HYPERLINK \l _bookmark29 4.1 橡胶延长因子 27 HYPERLINK \l _bookmark30 4.2 杜仲转录组 27 HYPERLINK \l _bookmark31 4.3 基因克隆 28 HYPERLINK \l _bookmark32 第三章 EuREF1 原核表达载体构建及 IPTG 诱导表达 29 HYPERLINK \l _bookmark33 1 材料 29 HYPERLINK \l _bookmark34 1.1 质粒和菌株 29 HYPERLINK \l _bookmark35 1.2 主要试剂 29 HYPERLINK \l _bookmark36 1.3 常用试剂配方 29 HYPERLINK \l _bookmark37 1.4 主要仪器设备 32 HYPERLINK \l _bookmark38 2 方法 32 HYPERLINK \l _bookmark39 2.1 EuREF1 原核表达载体构建 32 HYPERLINK \l _bookmark40 2.1.1 含双酶切位点的 EuREF1 扩增引物 33 I HYPERLINK \l _bookmark41 2.1.2 原核表达载体 pGEX-GST-EuREF1 构建 34 HYPERLINK \l _bookmark42 2.1.3 原核表达菌株鉴定 36 HYPERLINK \l _bookmark43 2.2 大肠杆菌原核表达 36 HYPERLINK \l _bookmark44 IPTG 诱导表达 36 HYPERLINK \l _bookmark45 SDS分析