课时日授课计划授课总第14讲.DOC

课 时 日 授 课 计 划 授课总第 14 讲 课程名称 生物工艺学 教研组长 意 见 签名 任课教师 严奉坤 日期 编写日期 授课日期 4 月 19 日 月 日 节 月 日 节 月 日 节 2010年4 授课班级 08生物化工 班 班 班 班 题 目 第四章 灭菌和空气净化 第一节 灭菌 目 的 要 求 1、通过本次课学习，能根据生产需要选择培养基灭菌，以及设备、管道灭菌条件 2、通过本次课学习，能准确地说出影响培养基灭菌的因素 重 点 难 点 1、理论灭菌时间的计算 2、影响培养基灭菌的因素 组 织 教 学 一、检查学生的出勤情况（1min） 二、复习、导入新课（10min） 三、授新课： 1、理论灭菌时间（34min） 2、影响培养基灭菌的因素（30min） 3、设备、管道灭菌条件（10min） 四、学生总结（5min） 大约用时 2学时 教具及电化教学手段等 教学手段以多媒体教学为主，使用《生化工艺》教学课件（自制）。 作 业 布 置 P79第7、9题 课 后 记 事 本次课全勤；由于08生物化工理科生比例比08生物技术（1）（2）班，学生对 本次课的理解得好一些，公式基本不用像08生物技术（1）（2）班上课时从头推导， 通过本次课同学们对实验室、工厂等灭菌条件从理论上有了深刻认识，注重培养学 生毕业后的可持续发展能力。 教 案 续 页 复习：灭菌的方法 授新课： 二、湿热灭菌的原理 湿热灭菌是直接用蒸汽灭菌。蒸汽冷凝时释放大量潜热，并具有强大的穿透力，在高温和水存在时，微生物细胞中的蛋白质极易发生不可逆的凝固性变性，致使微生物在短时间内死亡。 由于湿热灭菌有经济和快速等特点，因此被广泛用于工业生产。 用蒸汽加热的方法对培养基灭菌的要求是: 既要达到一定的灭菌程度，又要尽量减少营养成分的破坏。 高温杀菌作用原理 高温致死原理：由于它使微生物的蛋白质和核酸等重要生物高分子发生变性、破坏，导致微生物不能正常生长和繁殖。例如：它可使核酸发生脱氨、脱嘌呤或降解，以及破坏细胞膜上的类脂质成分等。 湿热灭菌要比干热灭菌更有效，这一方面是由于湿热易于传递热量，另一方面是由于湿热更易破坏保持蛋白质稳定性的氢键等结构，从而加速其变性。 理论灭菌时间 分子的分解和分子内部的重新排列的反应属于单分子反应。 杂菌虽然是一个复杂的高分子体系，但其受热被杀死，主要原因是高温能使蛋白质变性，这种反应属于单分子反应，因此杂菌在一定温度下受热死亡也遵循单分子反应方程。 微生物的热死规律——对数残留定律 dN/dt = - kN N—培养基中残留活菌数，个 t —受热时间，min k —死亡速度常数，min－1 dN/N = - k dt 从0→t，N0 → Nt， ∫（1/N）dN= - k∫dt ln Nt/No= - kt t =(2.303/k)lg(No/Nt) t：灭菌时间（秒） k：反应速度常数（s-１），与菌的种类和加热温度有关 No：灭菌开始时，污染的培养基中杂菌个数（个／ml） Nt：经过灭菌时间t后，残存活菌个数（个／ml）, 设计时常采用 Nt=0.001 。 培养基灭菌时间计算 （1）分批灭菌 例如：某发酵罐，内装培养基40m3，在121 ℃下进行分批灭菌。设培养基中含耐热芽孢为2×105 t = (2.303/k)lg(No/Nt) No = 40×106×2×105=8×1012个 Nt = 0.001 (灭菌失败几率) k=1.8 min-1，121 ℃ t = (2.303/1.8)lg(8×1012/0.001)= 20.34 min （2）连续灭菌 例如：某发酵罐，内装培养基40m3，在131 ℃下进行连续灭菌。设培养基中含耐热芽孢为2×105 t = (2.303/k)log(Co/Ct)； Co = 2×105 个/ ml 灭菌前含菌数； Ct = 0.001/40×106 = 2.5×10-11 个/ml 灭菌后的含菌数； k=15.3 min-1 ， 131℃ t = (2.303/15.3)lg(2×105/ 2.5×10-11 ) = 2.39 min 三、培养基的灭菌 1、培养基湿热灭菌的方法 （1）连续灭菌： 在发酵行业里也称“连消法”。此法只在大规模的发酵工厂中作培养基灭菌用。 主要操作：将培养基在发酵罐外连续不断地进行加热、维持和冷却，然后才进入发酵罐。实践中，培养基的连续灭菌一般在135～140℃下处理5～15秒钟。 连续加压灭菌法优点 ①因采用高温瞬时灭菌，故既可杀灭微生物，又可最大限度减少营养成分的破坏，从而提高了原料的