慢性牙周炎EBV1与HHV6感染及危险因素分析.docVIP

慢性牙周炎EBV1与HHV6感染及危险因素分析 　　【摘要】　目的　通过临床实践，分析慢性牙周炎EBV-1和HHV-6感染及其危险因素。方法　选取60位慢性牙周炎患者为研究对象，将其EBV-1与HHV-6阳性率与牙周健康者相比。然后通过病例-对照研究与logistic多因素回归分析，找出EBV-1与HHV-6感染的影响因素。结果　慢性牙周炎患者EBV-1与HHV-6的阳性感染率明显高于牙周健康者。结论　慢性牙周炎患者的EBV-1和HHV-6感染率较高。EBV-1感染与患者的年龄、CP以及牙周袋深度有关；而HHV-6感染与患者的年龄与CP有关。 　　【关键词】　慢性牙周炎；EBV-1；HHV-6；感染；危险因素 　　牙周病是一种频发的口腔疾病，严重威胁着人的身心健康。而慢性牙周炎作为一种常见的牙周病，不仅发病率高，而且较难治愈，给牙周炎患者带来了健康威胁。截至目前，我国仍未彻底解决牙周炎发病机制问题，现实中比较流行的“细菌致病学说”并不能合理解释牙周病间断性爆发以及部位特异性，而且临床实践效果并不理想。而在病毒研究中发现，EBV-1与HHV-6感染是慢性牙周炎疾病的重要诱因。因此，分析EBV-1和HHV-6感染与慢性牙周炎的关系，找出治疗慢性牙周炎的办法，成为本研究的主要内容。 　　1　资料与方法 　　1.1　一般资料　本研究以2011年在本院诊治的60位慢性牙周炎患者为研究对象。其中，男患者34例，女患者26例，平均年龄为41岁。此外，所有调查对象在就诊前1个月内未服用任何抗生素，且1年内也未作任何牙周炎方面的治疗。 　　1.2　提取样本　对慢性牙周炎患者进行样本提取，分别以牙周袋最深两牙的舌侧以及颊侧的远中、中间、近中六个位点为样本。在采样以前，先用1%浓度的H2O2溶液进行漱口；在采样过程中，用无菌纸尖轻轻插入牙齿龈沟至沟底30秒进行取样；在取样以后，将纸尖放于灭菌EP管并在-20℃冷冻条件下保存。 　　1.3　nPCR　应用巢式PCR技术检测龈沟液中2种疱疹病毒：人疱疹病毒6型（英文名为HHV-6）以及EB病毒1型（英文名为EBV-1）。引物合成：EB病毒1型根据Parra　B所应用的设计方法进行引物设计，人疱疹病毒6型根据SvetlanaChapenko所应用的设计方法进行引物设计。 　　PCR体系：总反应体系20μ，l内含2×Taq　PCRMasterMix　10μl、0.7μl的上下游引物、1μl的DNA模板提取液，用水补至20μl。 　　第一轮PCR反应条件：EBV-1、HHV-6反应条件相同，94℃预变性三分钟后，进入主循环。 　　第二轮PCR反应条件：取第一轮PCR反应结果为模板，在第一轮的基础上再扩增32个循环。EB病毒1型的反应条件为94℃预变性三分钟后，进入主循环。人疱疹病毒6型反应条件是94℃预变性三分钟后，进入主循环。 　　对照设置：实验研究中将EBV-1、HHV-6两种病毒的DNA为模板的阳性对照，无菌去离子水为阴性对照。 　　1.4　统计学分析　为了增强数据统计效果，通常会采用SPSS13.0统计软件进行操作。而且，最好通过χ2检验进行率的比较。如果理论数5，那么P值计算应当采用Fisher法。在感染危险因素方面，首先进行单因素χ2检验，然后进行多因素分析。当P0.05时，表示具备显著性差异。 　　2　结果 　　调查结果显示，慢性牙周炎患者的EBV-1阳性率和HHV-6阳性率分别为72.1%、46.9%，明显高于牙周健康者的16.8%、11.2%，两者的P0.05，具有明显的差异性和统计学意义。 　　EBV-1与HHV-6阳性感染危险因素χ2检验结果：首先，通过Fisher法，计算慢性胃炎、冠心病、糖尿病组的P值；然后，在此基础上，筛选出慢性牙周炎、牙周袋深度组进入logistic回归模型。 　　EBV-1与HHV-6多因素logistic回归模型分析结果：EBV-1感染与患者的年龄、CP以及牙周袋深度相关；而HHV-6感染与患者的年龄与CP相关。 　　3　讨论 　　本实验结果显示慢性牙周炎中EBV-1阳性感染率较高，与牙周健康者的阳性感染率有着明显的差异，这与国外研究出的感染率相近。本实验中HHV-6的阳性感染率是46.4%，其与国外学者对慢性牙周炎报道相似。通过研究显示牙龈指数与EBV感染密切相关，所以将牙龈指数例如到实验设计当中。在实验研究的过程中，为发现其他影响因素对牙周组织感染的影响。本实验应用病例—对照方式，并引入其他分析方法，对慢性牙周炎与EBV-1、HHV-6感染相关性进行分析。 　　在以前的实验研究显示吸烟是CP的危险因素，但是在本实验的研究结果显示吸烟与病毒感染无关。出现这种情况的原因，可能是吸烟对细菌与病毒的感染机理不同，吸烟对牙龈卟