维生素D临床知识产品培训培训课件.ppt

* 校准品、质控品、样品均被样品稀释液稀释是样本准备。 辣根标记的25羟基维生素D3抗原-即是酶标抗原 包被了鼠单克隆抗体的微孔即是 固相的抗体 稀释的样本是待测VD3 TMB是显色剂，能在酶催化下反应显色 酶标仪测定的吸光度与酶催化的显色成正比，显色越明显，说明酶越多，酶标记的抗原即酶标记的VD3越多 因我们采用竞争法，所以显色越浅，说明待测样本中VD3越多 * 最好具备全套加样器或 移液器，常用的50、100、200、，10ul需特殊配备枪头，1000ul特大枪头 没有洗板机，需专业学习手动洗板方法 * 移液器： 1、选择量程和移液器最靠近或接近的； 2、吸取液体时，移液器要垂直，慢进慢出 3、同一溶液多次加样，若碰到样孔内壁，必须换枪头 * 维生素D3测试，大约要3小时，其中复溶干粉及混匀和恢复常温约20分钟，试剂准备-调制标准液体、质控液、样本液约15分钟。往包被板中加标准液、质控液、样本液、酶工作液（48孔为例）约20分钟。温育1小时，洗板干燥约15分钟，加底物约20分钟，温育15分钟，加终止液10分钟，测量1分钟共计约3小时。 * 注意：配制不同浓度的标准溶液就是变相的稀释部分4号标液，只需要4号标液和样本稀释液按不同比例混合，理解为主 * 在竞争法ELISA中则相反，阴性孔呈色深于阳性孔。 指数方程下，Y代表OD值。 反过来，对数方程下，X代表OD值。 * *