培养基的认识及选择课件.pptVIP

* 培养基的认识及选择 培养基的成分 营养物质：水、蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖醇类、血液、无机盐、鸡蛋、动物血清、生长因子（Vit、aa、嘌呤、嘧啶等）。 氮源 氮源和碳源 无糖 碳源和能源 氯化钠：维持酶的活性、调节菌体内外渗透压 磷酸盐：缓冲作用 培养基的成分 凝固物质：最常用的为琼脂(agar)，它是从石花菜中提出来的一种半乳糖胶，100℃溶解，40℃凝固，可利用琼脂来改变培养基的物理性状(固体或半固体)，它是理想的固体培养基的赋形剂，其本身不被细菌分解利用，也无营养作用。 培养基的成分 抑菌剂和指示剂： 不是细菌生长繁殖的必需物质，是制备细菌的选择、鉴别培养基和判断结果的需要。 常用的指示剂有：酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国兰等酸碱指示剂，美兰为常用的氧化还原指示剂。 常用的抑菌剂有：胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及一些染料和某些抗生素等。 培养基的分类 液体培养基：牛肉汤(牛肉浸液+1%蛋白胨 +0.5%NaCl pH7.4) 半固体培养基：液体培养基+0.2~0.5% agar 固体培养基：液体营养物+ 2% agar 按物理性状 常用的培养基 血琼脂平板 巧克力平板 淋球菌平板 念珠菌显色平板 MAC平板 SS平板 EMB平板 TCBS平板 M-H平板 M-H血平板 转运培养基 血琼脂平板 适用于各类细菌生长 观察细菌菌落形态 判断溶血情况 α-溶血环：菌落周围呈绿色，红细胞不完全溶解 β-溶血环：菌落周围的培养基内红细胞完全被破坏 γ溶血：不溶血 巧克力平板 主要用于嗜血杆菌的分离：含有Ⅴ、Ⅹ因子 添加万古霉素抑制革兰阳性菌，但有时α-溶血的链球菌会形成草绿色溶血环 大多数革兰阴性菌都会生长 淋球菌平板 用于分离淋病奈瑟菌 加入万古霉素和多粘菌素B溶液 抑制革兰阳性菌和真菌生长 念珠菌显色平板 分离酵母样真菌 鉴别培养基：不同的真菌显示出不同颜色的菌落 MAC平板 选择性培养基：供肠道致病菌分离培养 非发酵菌鉴别 抑制剂——胆盐：抑制革兰阳性菌 指示剂——中性红：区分分解乳糖和不分解乳糖的细菌 肠道致病菌不分解乳糖，非致病菌分解乳糖 SS平板 强选择性培养基：用于志贺菌和沙门菌的分离 抑制剂——枸橼酸钠、胆盐、硫代硫酸钠协同作用与煌绿共同抑制肠道非病原菌及大部分大肠埃希菌。其中胆盐还能抑制革兰阳性菌。 指示剂——中性红 沙门菌菌落特点：无色半透明，产H2S与培养基内三价铁离子反应呈黑色中心。 志贺菌菌落特点：无色不透明或透明，边缘整齐 EMB平板 弱选择性培养基 抑制革兰阳性菌 伊红和美蓝两种染料一酸一碱作为指示剂 细菌分解乳糖时产酸，使伊红美蓝结合成紫红色化合物，有时呈金属光泽 不分解乳糖的细菌菌落为无色或灰白色 有的细菌产碱过多而出现蓝色菌落 TCBS平板硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基 霍乱弧菌和副溶血弧菌分离培养 碱性琼脂 胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群 氯化钠可刺激弧菌的生长 以麝香草酚兰和溴麝香草酚兰为指示剂 霍乱弧菌分解蔗糖产酸，菌落呈黄色半透明，圆形扁平，带有黏性不易挑起 副溶血弧菌不分解蔗糖，菌落呈蓝绿色半透明，大而扁平，带有黏性 M-H平板水解酪蛋白琼脂 用于细菌药敏试验琼脂扩散法（K-B法） 胸腺嘧啶核苷酸含量低，不干扰磺胺类药物测定 控制钙、镁离子浓度，不干扰氨基糖苷类药物测定 M-H血平板 M-H琼脂中加入5%脱纤维羊血 用于链球菌药敏试验 *