优质L-天冬酰胺酶的开发与应用及重组表达研究进展.PDF

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１７，３７（１１）：１２３１３１ ＤＯＩ：１０．１３５２３／ｊ．ｃｂ 优质Ｌ天冬酰胺酶的开发与应用 及重组表达研究进展 曾　杰 （江苏恒瑞医药股份有限公司 国家靶向药物工程技术研究中心　连云港　２２２０４７） 摘要　Ｌ天冬酰胺酶用于治疗急性淋巴细胞白血病与淋巴瘤，但高昂的价格限制了临床上的广泛 应用，重组表达解决了成本的难题。Ｌ天冬酰胺酶所具有的低谷氨酰胺酶活性是其副作用的根 源，同时细菌来源的Ｌ天冬酰胺酶能导致危及生命的过敏反应，寻找副作用更低的优质Ｌ天冬酰 胺酶及其修饰方法，成为研究的重点。对Ｌ天冬酰胺酶的重组表达，及具有更优性质的Ｌ天冬酰 胺酶开发进展进行了综述，并阐明其在临床治疗及食品工业领域的巨大应用潜力。 关键词　天冬酰胺酶　重组表达　毒副作用　急性淋巴细胞白血病　丙烯酰胺 中图分类号　Ｑ８１ 　　白血病及淋巴瘤是最常见的造血系统恶性疾病， １　Ｌ天冬酰胺酶概述 其中淋巴瘤的发生率约４％，是增长最迅速的恶性肿瘤 之一。白血病的发病率约为十万分之四，每年新增约４ １．１　Ｌ天冬酰胺酶的历史 ［１］ 万例白血病患者，其中４０％是儿童，并以２～７岁儿童 　　１９５３年，Ｋｉｄｄ 首次发现豚鼠血清能够抑制小鼠 ［２］ 居多，且７０％～８０％为急性淋巴细胞白血病。其病因 体内的淋巴瘤，１９６１年，Ｂｒｏｏｍｅ 第一个证实了豚鼠血 可能与病毒感染、家族遗传有关，室内及室外环境污染 清中的抗肿瘤活性成分为 Ｌ天冬酰胺酶，１９６４年， ［３］ 理化刺激也是重要的诱因。对白血病及淋巴瘤患者的 Ｍａｓｈｂｕｒｎ和Ｗｒｉｓｔｏｎ 发现大肠杆菌中的Ｌ天冬酰胺 有效治疗，成为中国乃至全球最重要的课题之一。Ｌ天 酶（Ｌａｓｐａｒａｇｉｎａｓｅ，ＥＣ３．５．１．１）具有抗肿瘤活性，从此 冬酰胺酶作为治疗急性淋巴细胞白血病及淋巴瘤的药 开始了大肠杆菌Ｌ天冬酰胺酶药物开发的研究。１９７８ 物，其昂贵的价格限制了临床上的广泛运用。利用基 年，第一个被美国食品药品监督管理局（ＦＤＡ）批准用 因工程技术重组表达Ｌ天冬酰胺酶，产量高，能够有效 于治疗急性淋 巴细胞 白血病 （ａｃｕｔｅｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃ 降低生产成本，促使价格更低廉的Ｌ天冬酰胺酶出现。 ｌｅｕｋｅｍｉａ，ＡＬＬ）的Ｌ天冬酰胺酶药物造福癌症患者，现 但市场上现存的Ｌ天冬酰胺酶药物均存在多种副作用 在已成为治疗儿童ＡＬＬ联合化疗的重要化药组合。 与不足，如过敏反应、免疫抑制、胰腺炎、神经毒性、肝 １．２　Ｌ天冬酰胺酶的性质 炎、凝血障碍、产生抗体治疗失败等。开发副作用更低 　　大肠杆菌的Ｌ天冬酰胺酶分为Ｉ型与ＩＩ型，Ｌ天冬 酰胺酶Ｉ（ＥＣ１，Ｋ ＝５ｍｍｏｌ／Ｌ）组成型表达于细胞质 的优质Ｌ天冬酰胺酶及对其进行适当修饰成为解决这 ｍ 些弊端行之有效的途径。同时，除了应用在临床治疗 中，能够水解 Ｌ天冬酰胺（ＬＡｓｎ）与 Ｌ谷氨酰胺（Ｌ 领域，Ｌ天冬酰胺酶能够减少加热食物过程中Ｌ天冬 Ｇｌｎ），但对 ＬＡｓｎ的亲和力低；Ｌ天冬酰