农杆菌介导磷高效转录因子OsPTF1转化大豆研究Transformationof.PDFVIP

分子植物育种，2013 年，第11 卷，第6 期，第688-693 页 Molecular Plant Breeding, 2013, Vol.11, No.6, 688-693 研究论文 Research Article 农杆菌介导磷高效转录因子OsPTF1 转化大豆研究 * 梁慧珍 董薇 余永亮 杨红旗 杜华 李彩云 河南省农业科学院芝麻研究中心, 郑州, 450002 * 通讯作者, lhzh66666@163.com 摘 要 本研究将水稻耐低磷基因OsPTF1 基因构建植物高效表达载体pTF101.1-35S-OsPTF1-NOS ，通过 农杆菌介导法将OsPTF1 基因转入黄淮海地区优良品种商豆 1099 子叶节中，成功获得转基因植株。大豆属 于难转化作物，在本研究中，对大豆转基因中大豆萌发指标和侵染方式进行优化选择。结果表明：大豆转基 因萌发时间以48 h 为宜；大豆子叶节受体比大豆胚尖受体更容易转化。经过PCR 分子初步检测，有3 株转 化植株整合有OsPTF1 外源基因，表明OsPTF1 基因已初步整合到大豆基因组中。 关键词 大豆, 农杆菌, 磷高效, OsPTF1 基因, 转基因 Transformation of OsPTF1 into Soybean by Agrobacterium -mediated Method Liang Huizhen * Dong Wei Yu Yongliang Yang Hongqi Du Hua Li Caiyung Henan Sesame Research Center, Henan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou, 450002 * Corresponding author, lhzh66666@163.com DOI: 10.3969/mpb.011.000688 Abstract In this study, a binary vector pTF101.1-35S-OsPTF1-NOS was constructed from the rice OsPTF1 gene, a transcription factor involved in tolerance to phosphate-starvation in rice. A elite commercial bean cultivar in Huang-Huai-Hai region, Shangdou 1099, was successfully transformed with the vector via Agrobacterium -mediated transformation method. The transformation conditions and parameters was assessed with the consideration of germinating time and infection pattern. The results showed that the optimal germinating time is 48 hours, and that cotyledonary node is the better recipient of transformation than embryonic tips. The gene of OsPTF1 was amplified by PCR from 3 transgenic lines, indicating that the gene had integrated into the bean genome. Keywords Soybean, Agrobacterium , High-phosphorus efficiency, OsPTF1 gene, Transgenic 大豆(Glycine max)富含蛋白质和油脂，是重要的 近年来转基因技术取得了很大的进展，通过转基因 粮饲兼用作物。中国曾经是大豆出口国，但近十年来 可以得到产量高、质量好、抗逆性强和抗病虫害的大 已经变成进口大国，进口量呈逐年上升的趋势。据海 豆新种质资源。但大豆属于难转化作物，转化效率较 关总署2013 年 1 月 10 日公布的数据，2012 年中国 低，中国转基因大豆研究存在一些难题，如：缺少拥 大豆进口量5.838×1010 kg ，较上年增加11.