甘蓝枯萎病菌原生质体制备与再生条件优化.PDFVIP

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中国农学通报 2011,27(10):203-207 Chinese Agricultural Science Bulletin 甘蓝枯萎病菌原生质体的制备与再生条件的优化 1,2 1 1 2 2 3 1 李伶俐 ,严 红 ,李兴红 ,姜于兰 ,向红琼 ,杨腊英 ,燕继晔 1 2 (北京市农林科学院植物保护环境保护研究所,北京100097;贵州大学农学院,贵阳550025; 3 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海南儋州571737) 摘 要:建立甘蓝枯萎病菌(Fusarium oxy sp orum f.sp. conglutinans)高效遗传转化体系的途径之一是获得 其具有再生功能的原生质体。本研究通过对甘蓝枯萎病菌菌丝摇培时间、菌丝的酶解时间、保护原生质 体的渗透压稳定剂的种类和浓度等因素进行优化,建立了制备甘蓝枯萎病菌原生质体的高效、稳定体 系,并在SR 固体培养基上实现了甘蓝枯萎病菌原生质体的再生,再生率可达21.13% 。该体系的获得将 为下一步甘蓝枯萎病菌高效遗传转化体系的建立和致病机理的解析奠定基础。 关键词:甘蓝枯萎病菌;原生质体;再生条件 中图分类号:S432 文献标志码:A 论文编号:2010-3295 OptimizingMethodforProtoplastPreparationandRegenerationinFusariumoxysporumf.sp. conglutinans 1,2 1 1 2 1 3 1 LiLingli ,YanHong,LiXinghong,JiangYulan,XiangHongqiong,YangLaying,YanJiye (Institute of Plant and Environment Protection, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Science,Beijing100097;1 2College of Agronomy, Guizhou University,Guiyang550025; 3Environment and Plant Protection Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences,DanzhouHainan571737) Abstract: Protoplastpreparationandregenerationisoneofthemostimportantmethodsforconstructing genetic transformation in Fusarium oxysporum f.sp. conglutinans. The culture time of mycelium, the enzymolysistime,theosmoticstabilizertyperandtheosmoticstabilizerconcentrationwereoptimized,atlast the author gained an efficient method for protoplast preparation and regeneration of F. oxysporum. Furthermore,theprotoplastcanregenerateonre

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