DNA复制-9幻灯片.pptVIP

* * * * * DNA的复制与修复 内容提要 1.DNA复制的原则与过程 4.DNA复制与修复的实例分析 3.DNA的突变 2.DNA的损伤和修复 内容提要 1.DNA复制的原则与过程 4.DNA复制与修复的实例分析 3.DNA的突变 2.DNA的损伤和修复 DNA的半保留复制 DNA的半不连续复制 参与DNA复制的酶类和蛋白质 DNA复制的过程 DNA的半保留复制 全保留复制： 新复制的DNA分子直接形成，没有亲代DNA的存在； 半保留复制： 子代DNA分子 其中的一条链来自亲代DNA ，另一条链是新合成的； 分散复制： 子代DNA分子中新旧部分都有，但是分配是随机的。 DNA的半保留复制 DNA 在复制时，两条链解开分别作为模板，在DNA聚合酶的催化下，按碱基互补的原则，合成两条与模板连互补的新链，以组成新的DNA分子。这样形成的两个子代DNA分子与亲代DNA分子的碱基序列完全一样，这种复制方式成为DNA的半保留复制。 模板 亲代的DNA双链，每股链都可作为模板； 原则 按碱基配对原则指导新链的合成 特点 合成的两个子代DNA分子碱基顺序与亲代分子完全一样； 一条链来自于亲代的DNA链，另一条链是新合成的链。 半不保留复制 亲代DNA 子代DNA DNA的半不连续复制 1. 所有已知的DNA 聚合酶的合成方向是5’ 3’, 而不是3’ 5’; 2. DNA分子的两条链是反向平行的，一条链的走向是5’ 3’, 而 另一条链的走向是3’ 5’。 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ DNA分子合成过程中，子代DNA中一条链的合成是连续的，另一条链的合成是不连续的，DNA的这种复制方式成为半不连续复制。 DNA的半不连续复制 前导链 DNA复制时，一股以3’ 5’方向的母链作为模板，指导新合成的链以5’ 3’方向连续合成的链称为前导链。 复制方向与解链方向一致 随从链 DNA复制时，一股以5’ 3’方向的母链作为模板，指导新合成的链以5’ 3合成多个核苷酸不连续的小片段的链称为随从链。 复制方向与解链方向相反 冈崎片段 DNA复制时，一股以5’ 3’方向的母链作为模板，指导新合成的链以5’ 3合成的多个核苷酸不连续的小片段称为冈崎片段。 岗崎片段由DNA连接酶连成一条完整的新链。 参与DNA复制的酶类和蛋白质 DNA 聚合酶 DNA聚合酶（DNA Polymerase）是一种参与DNA复制的酶。它主要是以模板的形式，在有适量镁离子存在时，催化四种脱氧核糖核苷三磷酸合成DNA。所合成的DNA具有与天然DNA同样的化学结构与物理化学性质。 反 应 特 点 以四种脱氧核糖核苷三磷酸为底物； 反应需要接受模板指导； 反应需要有引物3’-羟基存在； DNA链的生长方向为5’ 3’； 产物DNA的性质与模板相同。 错配碱基 3’-5’核酸外切酶水解位点 5’-3’核酸外切酶水解位点 单链缺口 参与DNA复制的酶类和蛋白质 大肠杆菌聚合酶 DNA聚合酶I 5’-3’外切酶； 3’-5’外切酶； 5’-3’聚合酶； 由3’端使DNA链发生焦磷酸化； 参与DNA复制的酶类和蛋白质 大肠杆菌聚合酶 DNA聚合酶II 3’-5’外切酶； 无5’-3’外切酶； 不是复制酶，是修复酶； 多亚基酶 DNA聚合酶III 3’-5’外切酶； 无5’-3’外切酶； 复制中起主要作用的聚合酶； 多亚基酶。 参与DNA复制的酶类和蛋白质 DNA 连接酶 DNA连接酶（DNA ligase）是一种催化两条DNA之间3’, 5’磷酸二酯健形成的酶 以ATP为能量来源的动物细胞和某些噬菌体连接酶—T4连接酶； 以NAD+为能量来源的大肠杆菌DNA连接酶； 参与DNA复制的酶类和蛋白质 DNA 连接酶 应用: 1.岗崎片段之间的连接； 2.DNA损伤修复中的连接； 3.一种重要的工具酶: 限制性内切酶切割后形成的粘性末端或平头末端的连接； 参与DNA复制的酶类和蛋白质 解螺旋酶 拓扑异构酶 RNA引物酶 通过水解ATP获得能量从而松开双股DNA，每解开一对核苷酸需要两分子的ATP; I类：使DNA的一条链发生断裂和再连接，反应无需供给能量； II类：使DNA的两条链同时发生断裂和再连接，当它引入超螺旋时需要由ATP供给能量； 不同于催化转入过程的RNA聚合酶，通畅需要与几种蛋白子因子结合形成引发体才能发挥作用。 DNA 复制的过程 复制起点 三个13bp序列和四个9bp序列 复制起点上四个9bp重复序列为Dna A蛋白的结合位点，大约20-40个Dna A蛋白