骨髓细胞特异性酯酶染色标准操作程序.docVIP

骨髓细胞特异性酯酶染色标准操作程序 1.检验目的 急性白血病鉴别；鉴别嗜碱性细胞(阴性或弱阳性)与组织嗜碱细胞(阳性)。 2.检测原理（包括结果计算） 氯乙酸AS-D萘酚被细胞内酯酶水解，产生萘酚AS-D，再与六偶氮新品红作用，生成不溶性红色沉淀，定位于细胞质内。 3.性能特征 无。 4.标本要求 （包括病人准备、容器、样本类型等） 4.1 病人准备：了解病人是否对局麻药有过敏史。凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。 4.2 标本类型：骨髓。 4.3标本容器：洁净载玻片。 4.4 标本存放: 4.4.1未检测标本的存放：放于细胞室未检测标本架上。 4.4.2已检测标本的存放：骨髓存片柜，保存10年以上。 4.5 标本运输:室温条件下运输。 4.6 标本拒收标准：参照《采集手册》。 5.仪器和试剂 5.1试剂名称:氯乙酸AS-D萘酚酯酶（AS-DNCE）染色液 5.2试剂来源：：上海太阳生物技术有限公司 5.3试剂准备：试剂为即用式。 5.4试剂贮存：2～8℃保存，有效期九个月。 5.5试剂组成：Ⅰ液：30mg×5,Ⅱ液：30ml×5。 5.5.l 甲醛-丙酮缓冲液(pH 6.6) 5.5.2 0.067 mol/L 磷酸盐缓冲液(pH 7.6) Na2HP04 8.8 g KH2P04 0.9 g 蒸镏水 1000 ml