大八角根化学成分的研究.docVIP

大八角根化学成分的研究 　　[摘要]采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS及制备型HPLC等多种色谱技术，从大八角根中分离得到10个化合物，根据理化性质及波谱数据（MS， 1H， 13C-NMR）分析分别鉴定为cycloparviflorolide（1），cycloparvifloralone（2），tashironin（3），tashironin A（4），anislactone A（5），anislactone B（6），pseudomajucin（7），syringaldehyde（8），methyl-4-hydroxy-3，5-dimethoxybenzoate（9）和（E）-3-methoxy-4，5- methylenedioxycinnamic alchol（10）。其中化合物1～4，8～10为首次从该植物中分离得到。在1.0×10-5 mol?L-1下，在LPS刺激小鼠小胶质细胞释放NO抑制模型上，化合物5，6抑制率分别为75.31%，53.7%。 　　[关键词]大八角； 化学成分； 倍半萜 　　大八角Illicium majus Hook et Thoms为八角科八角属植物，乔木，广泛分布于我国南部、缅甸南部及越南北部[1]。作为民间传统草药，大八角的根、叶和树皮具有理气和胃、活血止痛和祛风除湿的功效，可用于治疗胃脘胀痛及关节肿痛。目前文献报道大八角中主要含有二萜和倍半萜类化合物[2-6]，为了进一步阐明该植物的化学成分，本实验对大八角根的95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行了系统研究，从中分离并鉴定了10个化合物，包括7个倍半萜、2个酚类化合物及1个苯丙素类化合物。其中化合物1～4，8～10为首次从该植物中分离得到。 　　1材料 　　Bruker AV 500-Ⅲ核磁共振仪；Inova-500 核磁共振仪；Agilent 1000 Series LC-MSD-Trap-SL型ESI-MS质谱仪；Agilent 1100 Series液相色谱仪；制备型色谱柱YMC-Pack ODS-A（20 mm×250 mm，10 μm）；制备型HPLC（SPD-10A紫外检测器和RID-10A示差检测器）；薄层色谱硅胶GF254及柱色谱用硅胶（100～200，200～300目）均为青岛海洋化工厂生产；葡聚糖凝胶Sephadex LH-20 为Amersham Pharmacia Biotech AB 生产；D101型大孔吸附树脂购自天津南开化工厂；所用分析纯试剂均为北京化工厂生产；色谱纯试剂Dikama（美国Tedia公司），Fisher（美国Fisher公司）；显色剂为10%硫酸乙醇溶液。 　　大八角根于2009年10 月采于广西省，由广西中医学院韦松基教授鉴定为八角属植物大八角I. majus的根。植物标本保存于中国医学科学院药物研究所标本室（ID-21975）。 　　2提取和分离 　　干燥的大八角根12 kg，粉碎未过筛，用95%乙醇40 L浸泡12 h后，加热回流提取3次，每次3 h，减压回收溶剂的浸膏600 g。然后将浸膏溶解于甲醇中，加入1.5 kg硅藻土拌样，干燥，装入索氏提取器，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇回流提取，减压回收溶剂后，得乙酸乙酯提取物 110 g。 　　乙酸乙酯提取物经大孔树脂柱色谱分离，分别以水，30%，50%，95%乙醇各10 L进行梯度洗脱，得到4个组分（A1 ～ A4）。组分A2 （28 g）经ODS反相硅胶柱色谱（甲醇-水，0 ～ 100%）分离得到6个流分（A2-1 ～ A2-6）。流分A2-3（4 g）经Sephadex LH-20柱色谱分离，以氯仿-甲醇（1∶1）洗脱，通过TLC检测（10%硫酸-乙醇显色）合并得到7个子流分（A2-3-1 ～ A2-3-7）。 流分A2-3-3（800 mg）以甲醇-水-三氟乙酸（65∶35∶0.03，流速5 mL?min-1）为流动相，经制备型HPLC分离得到化合物1（10 mg，tR=20.3 min），5（20 mg，tR=85 min），6（80 mg， tR = 97 min）；流分A2-3-2（300 mg）以甲醇-水-三氟乙酸（40∶60∶0.03，流速5 mL?min-1）为流动相， 经制备型HPLC分离得到化合物2（9 mg，tR=19.5 min），3（12 mg，tR=45 min），4（9 mg，tR=52 min）；流分A2-3-4（400 mg）以甲醇-水-三氟乙酸（15∶75∶0.03，流速5 mL?min-1）为流动相，通过制备型HPLC分离得化合物7（16 mg，tR=25.1 min）；对于流分A2-3-5（900 mg），采用乙腈-水（25∶75，流速5 mL?mi