巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建-中国农业科学院.PDFVIP

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巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建-中国农业科学院

生物技术通报 年第 期 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2008 2 巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建 , , 12 2 2 2 2 2 23 2 张建哲 韩红玉 姜连连 董辉 赵其平 卞庆松 闫晓菲 黄兵 1 2 ( 上海师范大学生命与环境科学学院,上海 ;中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200234 / 3 ;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐 ) 200232 830052 摘 要: 为构建巨型艾美耳球虫( )孢子化卵囊 表达文库,从 孢子化卵囊中提取 Eimeriamaxima cDNA E.maxima 总 ,以总 为模板、 TM 为载体,利用 TM 文库构建试剂盒构建全长 表达文库。经 RNA RNA λTriplex2 SMART cDNA cDNA 测定构建的 表达文库的原始文库容量为 6 ,扩增后的文库滴度为 10 ,重组率为 E.maximacDNA 1×10pfu/ml 5×10 pfu/ml 95%,插入片断主要集中在0.5~1kb之间。根据已知序列设计引物,能从文库中扩增出编码E.maxima免疫球蛋白重链结 合蛋白的基因序列片段。结果表明所构建的E.maximacDNA表达文库质量良好,为克隆、筛选E.maxima的功能性基因 奠定了基础。 关键词: 球虫 巨型艾美耳球虫 cDNA文库 SMART技术 ConstructionofthecDNALibraryofSporulatedOocysts ofE.maxima , 12 2 2 2 2 ZhangJianzhe HanHongyu JiangLianlian DongHui ZhaoQipin , 2 23

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