小柴胡化学成分的研究.docVIP

小柴胡化学成分的研究 　　作者简介：齐志众（1982-），男，助理实验师，研究方向：药物化学。 　　摘要：目的：为了开发利用小柴胡（Bupleurum tenue Buch.-Ham.ex D.Don）的天然资源，阐明其有效成分，对小柴胡根进行了化学成分研究。方法：运用色谱手段和波谱方法分离并鉴定化合物。结果：分离并鉴定8个化合物，它们的结构分别被鉴定为Kaerophyllin（1），Isokaerophyllin（2），咖啡酸乙酯（3），柴胡皂苷元F（4），槲皮素（5），山柰酚3-O-葡萄糖（6），芦丁（7），β - 谷甾醇（8）。结论：化合物1，2，3，4，6，8均为首次从小柴胡中分得。 　　关键词：柴胡；化学成分；分离；鉴定 　　小柴胡（Bupleurum tenue Buch.-Ham.ex D.Don）为伞形科（Umbelliferae）柴胡属（Bupleurum L.）植物，又名金柴胡（四川凉山雷波县）、芫荽柴胡（四川甘洛县、会东县）、竹叶柴胡（四川南川县）、滇银柴胡（云南）等。广泛分布于湖北、广西、四川、贵州、云南等省区。多生长在向阳山坡草丛中，或干燥沙地瘠土中，海拔600—2900米，以1500米以上为多[1]。本品有和解少阳，疏利肝胆，通达表里的功效，临床上用于少阳病，往来寒热，胸胁胀满，默默不欲饮食，心烦喜呕，口苦咽干目眩；或腹中痛，或胁下痛，或渴，或咳，或利，或悸，或小便不利，或汗后余热不解，及症发寒热，妇人伤寒热入血室等症。 　　有关小柴胡的化学成分研究国内外报道很少[2，3]，为了进一步开发利用小柴胡药用资源，阐明其有效成分，为小柴胡临床用药提供合理依据，我们对小柴胡进行了化学成分研究。从小柴胡的95%乙醇提取物的乙酸乙酯部分分离鉴定了8个化合物，其中6个为首次从该植物分离得到。 　　1 仪器和试剂 　　XT-4型显微熔点测定仪（北京泰克仪器有限公司，温度计未经校正）；WZZ-3型自动旋光仪（上海精密科学仪器有限公司）；Broker ACF-300（400MHz）型NMR仪，TMS为内标；柱色谱硅胶（200-300目）、薄层色谱板均为青岛海洋化工厂出品；其余试剂均为分析纯。小柴胡药材购自湖北省中药材公司，经贾效成副教授鉴定为小柴胡（Bupleurum tenue Buch.-Ham.ex D.Don）。 　　2 提取与分离 　　小柴胡根粉78kg经95%乙醇超声提取（温度在40℃），合并提取液，减压回收溶剂后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得石油醚部分65 g，乙酸乙酯部分210 g，正丁醇部分248g。其中乙酸乙酯部分以硅胶柱色谱分离，氯仿-甲醇（100：0～0：100）梯度洗脱，得到Fr.l- Fr.32共32个部分。Fr.3重结晶得到化合物1（203 mg），Fr.5重结晶得到化合物2（10 mg），Fr.9经硅胶柱色谱（石油醚一乙酸已酯=96：4）得到化合物8（34 mg），Fr.20经反复硅胶柱色谱（石油醚-丙酮=3：1），凝胶柱色谱（氯仿-甲醇 = 1：1）得到化合物3（46 mg）、4（58 mg），Fr.27经硅胶柱色谱（氯仿-甲醇 = 9：1）得到化合物5（91 mg）。Fr.23经Sephadex LH-20凝胶柱色谱（甲醇）分离及重结晶，得化合物6（23 mg）；Fr.24洗脱部分，经反复Sephadex LH-20凝胶柱色谱（甲醇）及硅胶柱色谱分离，得化合物7（18 mg）。 　　3 结构鉴定 　　Kaerophyllin（1）白色针晶（丙酮），mp.150～152℃。1H NMR（400 MHz，pyridine-d5）δ：401（1H，m，H-3），786（1H，d，J=20 Hz，H-5），264（1H，dd，J：148，96 Hz，H-6a），304（1H，dd，J=l48，46 Hz，H-6），725（1H，d，J=20 Hz，H-2），701（1H，d，J=84 Hz，H-5），735（1H，d，J=84 Hz，H-6），690（1H，s，H-2”），686（1H，d，J=78 Hz，H-5），675（1H，d，J=78 Hz，H-6），378（3H，s，OCH3），385（3H，s，OCH3），596（2H，s，OCH2O）；13C NMR（100 MHz，pyridine-d5）δ：1726（C-1），12741（C-2），396（C-3），697（C4），1372（C-5），374（C-6），1323（C-1），1098（C-2），1515（C-3），1484（C-4），1139（C-5），1242（C-6），1267（C-1”），1087（C-2”），1469（C-3”），1499（C4”），1123（C-5”），1226（C-6