妇科肿瘤项目的临床应用教学教案.pptVIP

* * 妇科肿瘤项目的临床应用 实验方法 酶放大化学发光 直接化学发光 双位点夹心免疫分析 微粒子 直径 0.08 +/- 0.02 mm 悬浮于微小反应体系中 50 - 100 mL 分析能力 极大的固相表面积 ~2.45 cm2 极大的分析物结合能力 50 - 1000 ng/cm 2 技术的创新 -----磁颗粒包被技术 微粒子包被 代表项目实验原理 X时间 发光 信号 Y 辉光(Glow) 坪区 速率法测量 原位进样 积分法测量 闪光 (Flash) 尖峰 化学发光信号的类型及测量方式的差别 依据发光方式分为闪光和辉光 AMPPD及其衍生物的化学发光系统(辉光) + * 477nm几十min O O OCH3 OPO32- O- O O OCH3 O O- O OCH3 HCG使用的底物 （西门子公司） Alkaline Phosphatase AMPD中等稳定中间体 2-30min 金刚烷 电子转移 间氧苯甲酸甲酯阴离子 LIGHT Dioxetane CH3 C=O O R N+ OH- H+ H2O2 + H2O + R OH 光子 + CO2 + CH3 C=O O R N HO CH3 C=O O R N HOO CH3 O N CH3 O N C=O O AFP等使用的化学发光物质 吖啶酯及其衍生物的化学发光系统（闪光） （西门子公司） HCG检测原理示意图（一步，单试剂） 珠—M-McAb L S-HCG-Ag 羊-poly-Ab-ALP B 加入底物substrate，发光，光电倍增管测定 离心，分离，液体进入夹层 一圈30min 夹心法 SIMENS IMMULITE AFP检测原理示意图 L-标记Ab兔PolyAb M L-磁颗粒固相M-McAb M Ag SIMENS BAYER * 37℃，7.5min * 废液探针吸走 SIMENS BAYER 光信号检测系统测定 L-标记Ab兔PolyAb M L-磁颗粒固相M-McAb M * 酸性试剂 碱性试剂 CA125检测原理示意图 S-Ag SIMENS BAYER L-标记Ab鼠McAb * 37℃，18min 标记AgAb * M L-磁颗粒固相M-McAb 37℃，18min M * 磁场分离，酸碱试剂发光 光信号检测系统测定 CA199检测原理示意图 S-Ag SIMENS BAYER L-标记Ab鼠McAb * 37℃，7.5min M L-磁颗粒固相McAb 37℃，20min M * 酸碱试剂发光 光信号检测系统测定 吸出，洗液1冲洗，去除过量未结合Ag100μl试剂水悬浮 M 磁颗粒固相AgAb 去除高剂量钩状效应，分离，吸出，洗液洗涤，加试剂水 临床意义—CA199 肿瘤相关抗原 诊断和监测胰腺肿瘤（良恶性鉴别） 胃肠道癌，尤其结肠癌 转移性胃肠道癌 检测胆管、肝细胞性、食道和非胃肠道肿瘤 监测术后复发（1000肿瘤全切是不可能的） 在月经与妊娠期15%或10%妇女可有升高 影响因素—CA199 溶血 脂血 黄疸 蛋白血 如为上述情况且程度较重时，结果变化可达近4% 临床意义—CA125 卵巢癌患者的治疗评估、监测复发 绝经期妇女结合超声，利用CA125可区分盆腔良恶性肿块 肝硬化、急性胰腺炎、子宫内膜异位症、盆腔炎、月经、妊娠前3个月 1-2%的健康人可出现CA125升高 临床意义—CEA 原发性结直肠癌 胃肠道癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌 非恶性疾病（老年人、吸烟者） 肿瘤切除后复发，监测和管理癌症的指标 * * *