实验四 feulgen反应显示细胞中的DNA-20141103.pptVIP

实验四Feulgen 反应显示细胞中的DNA 实验目的 了解Feulgen反应的基本原理 熟悉Feulgen反应的染色方法 掌握生物学绘图方式 实验原理 DNA可在酸性条件下水解，嘌呤—脱氧核糖之间的糖苷键断开，形成醛基(—CHO)，再用显示醛基的特异性试剂Schiff试剂处理，形成光镜下所见的细胞核内紫红色反应产物。 Schiff试剂的主要成分是碱性品红，碱性品红结构中的醌基是一个发色基团，经亚硫酸处理后，则醌基两端的双键打开，形成无色品红-硫酸复合物。 紫红色 洋葱根尖 Meristem 实验步骤 1）取 0.6cm 长的洋葱根尖放到离心管中； 2）加 1ml 1 mol/L HCl 在 60℃ 放置8 min； 3）弃去 HCl，用 2ml 蒸馏水浸泡漂洗片刻 ； 4）弃去蒸馏水，加 2ml Schiff试剂室温反应 15-30min （可选用20min） ； 5）弃去schiff试剂，用 1ml 亚硫酸氢钾洗 3 次，每次浸泡 2-3 min； 6）弃去亚硫酸氢钾，用 2ml 左右的蒸馏水漂洗 2 遍； 7）吸取洋葱根尖置于玻片上，稍微吸取水分；滴加 1 滴 4.5％ 醋酸，然后盖上盖玻片，轻压使根尖散开成单层云雾状； 8）观察：在低倍镜下找到分生区细胞，再高倍镜下观察细胞各部位的染色反应。  细胞膜/壁 细胞质 核仁