茶籽壳酸解液微生物发酵生产木糖醇研究-茶学专业论文.docxVIP

I I 摘 要 为了充分利用茶树资源，提高茶叶的经济附加值，促进茶产业的发展，在综合查 阅、参考国内外相关研究的基础上，对微生物发酵茶籽壳半纤维素木糖水解液生产木 糖醇进行了系统研究，以期为茶籽的综合利用提供技术支撑。论文利用茶籽壳中含有 丰富的半纤维素，通过酸水解产生含有木糖的水解液，脱毒后经热带假丝酵母菌发酵 产生木糖醇。论文具体内容及取得的研究结果如下： 1.茶籽壳酸水解制备木糖的研究 研究以超声波为辅助手段，稀盐酸为催化剂， 常压水解茶籽壳制备木糖，利用 3,5-二硝基水杨酸比色法（DNS 法）对水解液中的木 糖进行检测。通过正交试验考察了超声预提时间、酸浓度、茶籽壳粉碎度、水解时间 等对木糖产率的影响。研究表明各因素对木糖得率的影响由大到小的顺序依次为水解 时间、酸浓度、粉碎度、超声预提时间；最佳制备条件为：超声预提时间为 45min， 功率为 50KHZ，温度为 25-30℃，酸浓度为 0.6mol·L-1，粉碎度为 40 目，水解时间为 3h。在此条件下，木糖产率最高，达 28.44%。 2. 茶籽壳酸水解木糖液脱毒工艺研究 为了充分提高茶籽壳酸水解液的发酵生 产木糖醇的效率，本文对茶籽壳稀酸水解液的脱毒工艺进行了研究。在选用石灰石过 中和处理的基础上，试验选取有机溶剂萃取和活性炭吸附两种工艺对茶籽壳酸水解液 进行脱毒，对二者的脱毒效果进行比较，确定了一种相对理想的脱毒工艺，并对其工 艺参数进行了正交优化。结果表明：活性炭脱毒综合效果要优于有机溶剂萃取；优化 后的活性炭脱毒的最佳工艺参数为：pH 为 4.0，添加量 0.05g·mL-1，温度 55℃，水解 时间为 60min，在此条件下可以清除超过 74.25%的酸溶木素及其降解产物，同时木 糖保留率达到 80.03%。该工艺为后续的茶籽壳发酵生产木糖醇实验奠定了基础。 3. 热带假丝酵母发酵生产木糖醇的研究 以经过上述工艺脱毒后的茶籽壳酸水 解液为原料，利用热带假丝酵母 C. tropical AS2.1776 进行发酵以生产木糖醇。结果表 明：当起始水解液中木糖浓度约为 40g·L-1 时，发酵 6 天后，木糖基本被完全消耗； 正交试验表明，摇瓶分批发酵工艺条件的最佳组合是：250mL 锥形瓶中装液量 135mL， 起始 pH4.0，接种量为 15mL，氮源加入量为 5ml（内含 5g·L-1 酵母膏和 5g·L-1 蛋白胨 的混合物）。在该优化条件下，发酵水解液中木糖醇的浓度达到 19.59g·L-1，木糖转化 率达到 63.80%。 4. 木糖醇分离纯化的研究 研究用活性碳对上述含木糖醇的发酵液分批脱色，通 过考察活性碳用量、pH 值、温度、脱色时间对木糖醇发酵液的脱色效果及木糖醇回 收率的影响，确定了最佳脱色条件为：活性碳添加量 20%（w/v）、发酵液初始 pH6.0、 II II 脱色温度 40℃以及脱色时间 60min。在该条件下，对木糖醇浓度为 14.81 g·L-1 的发酵 液，脱色后，发酵液 420nm 下吸光度由初始的 0.658 降至 0.143，木糖醇浓度为 9.77g·L-1，脱色率和木糖醇回收率分别达到 78.27%和 65.97%。在此基础之上，将脱 色过后的木糖醇溶液过 732 型阳离子交换树脂以及 7170 型阴离子树脂进行脱盐处理， 脱盐后的溶液分别进行醇沉、冷冻干燥，最后得到纯度为 78%的木糖醇粗品。 关键词：茶籽壳，酸水解，发酵，热带假丝酵母菌，木糖醇 i i Abstract In order to utilize comprehensively tea resources and increase economic value of tea plants to promote the development of tea industry, this paper performed a systematic study on xylitol production from the hemicellulosic hydrolysate of tea seed shells by fermentation of Candida tropicals based on reviewing the references related to this subject. The major results attained were as followings. The production of xylose from tea seed shells with acid hydrolysis. In order to produce xylose from tea seed shells, hydrochloric