茶褐斑拟盘多毛孢对山茶致病机理的研究-森林保护学专业论文.docxVIP

论文独创性声明 \\\\\\\\\\\\\\ 州州州 Y1801U 1 本人郑囊声明:所呈交的学位文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人 戚集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构 的学位成证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均日在 论文中作了明确的说明并表示了谢意。 研究生签名 2 万句 1ρ(0 年 j 月{ 日 关于论文使用授权的声明 本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即 t 学校有权保留并向国家有 关部门成机构越交论文的复印件和电子版，允许论文被班阅和借阅，可以采用影印、缩印成扫描 等复制手段保存、汇编学位论文.同意四川农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学 位论文的全部成部分内容。 研究生签名: 九魂 l:V f? 年 j 月 18日 2?-ω年 6 月 f乒 摘要 本试验以茶褐斑拟撒多毛抱 [Pesta/otiopsis guepinii (Desm. ) Stey ]和朋林绿化常 用的山茶品种七心红 (Camel/ia pit αrdil)为试材，对茶褐斑拟撤多毛抱菌产生的致病相 关因子一一毒素和细胞璧降解酶进行了多方面的研究。筛选出了茶褐斑拟盘多毛抱产 毒的最佳培养条件，并对粗毒素的理化性质作了进一步的研究;对茶褐斑拟盘多毛拖 在活体内外产生的细胞壁降解酶种炎、活性及其动态变化进行了测定，并对细胞肆降 解酶的动力学特性进行了研究;通过毒素和细胞壁降解酶对山茶叶片各项生理生化指 标的影响，探索了茶褐斑拟盘多毛抱对山茶的致病机理。主要研究结果如下: 1.茶褐斑拟盘多毛抱在供试的液体培养基中可以产生对山茶有毒性作用的毒素， 对茶褐斑拟盘多毛抱酶的产毒培养条件的研究表明，该病菌的最佳产毒培养基是 Fries 培养基，最佳产毒培养条件是: 25C、培养液初始 pH5.0、连续光照、振荡培养 15do 2月 Fries 培养基在最佳培养条件下培养出的茶褐斑拟盘多毛抱菌滤液制备成粗 毒素，通过检测证明此粗毒素具有较强的热稳定性;对 pH 敏感，耐酸碱能力较差， pH5.0 时毒素致病活性最强;茶褐斑拟盘多毛抱粗毒素中具有生物活性的成分大多是 极性较大的物质。 3茶褐斑拟撒多毛抱在活体内外均能产生一系列细胞缝降解酶，其中木聚糖酶、 果胶甲基半乳糖瞪酸酶(p MG) 、归，4- 内切葡聚糖酶 (Cx)、。葡萄糖背酶在活体内 外的活性都较高，在致病过程中这几种酶起着重要作用;而漆酶在活体内外的活性都 很低，在致病过程中的作用较小。 4对木聚糖酶、 PMG、Cx 和札葡萄糖背酶的动力学特性研究表明， PMG 和 Cx 酶活反应的最适温度为 50C ，?-葡萄糖背酶和木聚糖酶反应的最适温度为 60C;Cx、 ?-葡萄糖背酶和木聚糖酶的最适 pH 均为 5.0，PMG 的最适 pH 为 5.ü-6.0，说明4 种 酶均倾向于弱酸性环境; Cx，PMG 和木聚糖酶随着反应时间的延长酶活性下降，而 日，葡萄糖背酶活性随反应时间的延长先急剧升高后缓慢下降 ;4 种细胞壁降解酶的最 大反应速度从大到小依次为木聚糖酶、 PMG、?-葡萄糖营酶、 Cx，它们和相应底物 的亲和力由弱到强顺序为 PMG、Cx、木聚糖酶、。.葡萄糖背酶。 5.生理生化测定表明，茶褐斑拟盘多毛抱的致病性是毒素和细胞壁降解酶协同作 用的结果。霉素和酶协同作用对山茶膜系统的损伤最大，毒素对细胞膜的损伤次之， 果胶酶、纤维素酶和木聚糖酶主要在病害扩展过程中起辅助作用;毒素在对山茶叶绿 体的破坏中起主导作用;毒素和细胞壁降解酶均能在损伤小时诱导山茶抗性，便可溶 性蛋白、可溶性糖含量及防御酶系 (SOD、POD 、PPO 等〉活性有所提高，但当机体 组织被破坏眉，山茶防御系统也被彻底破坏。 关键词:茶褐斑拟盘多毛础;山茶;毒素:细胞撵降解酶:生理生化特性 日 Abstract Cultivar Camel/iα pit αrdii of camel1ia， which have been grown in large sc毗讪 landscaping ，and Pestalotiopsis guepinii (Desm. ) Stey were selected as the research matieria1s in this experiment ωstudy 由e natures of pathogenicity-related factors，toxin and cell wa11-degrading enzymes(CWDEs) prod