产酸丙酸杆菌发酵生产丙酸过程优化与控制研究-发酵工程专业论文.docxVIP

唰唰州 ，。 唰唰州 ，。 恻川唰饨，h mmmpo 咄咄咄dt 州州auw 川川n川o 恻恻州叩AE- my 摘要 作为一种重要的 C3 平台化合物，两酸及其衍生物的用途十分广泛，可应用于有机 合成、食品、饲料、香料、涂料、染料、医药等方面。目前，丙酸的工业化生产方法为 化学合成法，随着化石燃料的价格上涨以及人们对绿色、健康的生物来源的化学品的追 求，发酵治生产丙酸受到越来越多研究者的关注。 本论文以一株能在胞外大量积累两酸的产酸丙酸杆菌 (Propionibacterium acidipropionicl) 为生产菌株，以丙酸的高产景、高得率和高生产强度为目标，对丙酸的 发酵过程进行了一系列的优化。主要研究结果如下: (1)采用逐级传代的方式，通过逐渐提高选择压力(丙酸浓度)的方法来提高卫 acidipropionici 的耐酸性能。经过近一年的适应性进化，获得可耐受 20 gIL丙酸的进化 菌株(出发菌株可耐受的丙酸浓度为 2.5 g1L)0 20 gIL甘油分批发酵条件下，和出发商 株相比，发酵时间缩短了 14.3%，菌体干重提高了 23.1%，丙酸产量提高 41.1%，生产 强度提高 65%。对进化菌株与出发菌株的胞内微环境研究显示，进化商株能荷水平提高 100%，氧化还原水平提高16.5%， H飞ATP部e 活性提高 52.7%。 (2) 优化得到了摇瓶培养条件下，两酸发酵的最佳营养及环境条件:酵母粉 10 g1L， 蛋白陈 5 g1L，甘油 20 g1L， CoCh 10 mgIL，接种量 10%，温度30C 。 (3) 在 7L 发酵罐上对丙酸发酵的培养模式进行了研究，考察不同甘油浓度下丙酸 分批发酵过程，发现仪通过分批培养难以实现细胞和丙酸高产量、高得率和高生产强度 的统一.脉冲补料、假速流加培养方式都可以实现丙酸菌细胞和丙酸的高产。综合比较 来看，初始甘油浓度为 30 以.， 72 h-120 h 恒速流加浓度为 400 钊的甘泊溶液，流速控 制为 0.01 LIh时最适合丙酸的发酵，发酵 220h ，细胞干重为4.46 gIL，两酸产量达 44.62 矶。 (4) 将最优培养模式在 10m3罐上进行发酵中试，最高丙酸产量达到 47.28 gIL，较7 L罐提高了6%，发酵周期为240h，较7L罐延长20h，说明该流加模式有较好的应用性， 可在工业化生产的规模上实现丙酸发酵的高产最。 (5) 对目的产品丙酸钙的提取进行研究发现，将发酵液经过 70C 保温 10min能降低 发酵液的粘度，提高过滤的效率:将不同粗细的硅藻土复合使用作助滤剂效果最佳，在 直径为 10cm的布氏漏斗上，先加 Ig细磁藻土做滤饼，另外 1 g粗硅藻土加入经过保温的 发酵液中，、混合均匀后真空泵抽滤，不仅过滤时间矩，而且过滤效果好:将过滤后的发 酵液喷雾干燥就能得到产品丙酸钙，具体喷雾干燥的条件为:进口温度 180C-200C ， 出口温度85C 。 | 关键词:两酸 ，Propionibacterium acid伊ropionici，适应性进化，发酵优化，两酸钙 E E 皿 皿 Abstract Abstract As an impo阳nt C3 platform chemical，propionic acid (PA) and its derivatives are widely used in organic synthesis，food，feed，spices，paint ，dye，medicine and so on. Currently，PA is mainly produced by petrochemical process. Wi也 the increase of fossi1 fuel price and the desire of human for 也，e green，healthy bio-based chemicals ，the biotechnological production ofPA attracts increasing attention. h 由is 也esis，Propionibacterium acid伊opionici，a s位础1 could accumulate high concentration ofPA is used for PA production. It is v町y 加lpOrtant to optimize the cu1tivation process of P. acid伊ropionici to achieve high concentration， high yield and high producti