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二、反应的环境因素 电解质:常用生理盐水或缓冲液 抗原抗体结合由亲水胶体转变为疏水胶体的过程中，电解质可以中和抗原抗体表面的电荷，破坏水化层，使抗原抗体复合物相互靠拢聚集，出现可见反应。电解质浓度过高会出现盐析现象。 酸碱度: 抗原抗体反应一般在pH6～pH8之间为宜。当反应液pH接近抗原等电点时，会引起抗原非特异性凝集。过低接近细菌等电点引起细菌自凝即非特异性酸凝集 温 度: 15℃～40℃，37℃最适 第四节 抗原抗体反应的类型 反应类型 实验技术 结果判断 凝集反应 直接凝集试验 观察凝集现象 间接凝集试验 同上 抗球蛋白试验 同上 沉淀反应 液相沉淀试验 观察沉淀，检测浊度 免疫电泳技术 观察扫描沉淀峰、沉淀弧 补体参与的反应 补体溶血试验 观察测定溶血现象 补体结合试验 同上 反应类型 实验技术 结果判断 中和反应 病毒中和试验 检测病毒感染性 毒素中和试验 检测外毒素毒性 标记免疫反应 荧光免疫技术 检测荧光现象 放射免疫技术 检测放射性强度 酶免疫技术 检测酶底物显色 发光免疫技术 检测发光强度 金免疫技术 检测金颗粒沉淀 思考题 胚胎抗原类（fetal antigen) 是在胚胎发育阶段由胚胎组织产生的正常成分，正常个体在出生后消失或仅存微量，但细胞癌变时，此类抗原可重新合成。 甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA） 1．什么是抗原抗体反应？ 抗原抗体反应的原理是什么？ 2．抗原抗体的结合力有哪些？ 3．抗原抗体反应有哪些特点？ 4．如何理解抗原抗体反应的特异性和交叉反应？ 5．什么是抗原抗体反应的可逆性？有何应用？ 6．如何理解抗原抗体反应的亲和力和亲合力？ 7．抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例？ 8．抗原抗体反应有哪些影响因素？ 9．基于抗原抗体反应的免疫学检测技术有哪些？ 10．什么是标记免疫技术？标记免疫技术有哪些类型？ 抗原抗体反应 Antigen-antibody reaction 本章内容 1.Principle of Ag-Ab reaction 2.Characteristics of Ag-Ab reaction 3.Influencing factors of Ag-Ab reaction 4.Types of Ag-Ab reaction 抗原抗体反应概念 抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。 抗原（antigen，Ag） 能够刺激机体免疫系统产生免疫应答，并能与免疫应答产物发生特异性结合的物质。 抗体(antibody, Ab) 机体的免疫系统受抗原物质刺激后，B细胞增殖分化为浆细胞所产生的一类能与抗原发生特异性结合的球蛋白。 抗原抗体反应形式 体内反应 体液免疫应答的效应作用（吞噬、溶菌、中和毒素等） 体外反应 肉眼可见或仪器可检测的反应（凝集反应、沉淀反应、标记免疫反应等） 体外抗原抗体反应也称血清学反应 （serological reaction） 第一节 抗原抗体反应的原理 物质基础: 抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性 抗原表位与抗体超变区密切接触 抗原抗体之间的结合力 亲水胶体转化为疏水胶体 一、抗原抗体结合力：抗原抗体是非共价键结合，弱结合力 ●静电引力:是抗原抗体分子中带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力,两个电荷距离越近,静电引力越大. ●范德华引力:抗原和抗体相互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力 . ●氢键结合力：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力 ●疏水作用力：两个疏水基团在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向聚集的力. 结合力的强弱： 疏水作用力氢键结合力静电引力范德华引力 抗原抗体结合力示意图 - + 范德华力 抗原 抗体 氢键结合力 O N H H 静电引力 - - + + - + + - - + 疏水作用力 排斥的水 二、抗原抗体的亲和力与亲合力 1.亲和力(affinity):抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间的结合强度，是抗原抗体间固有的结合力 亲和力可用平衡常数K表示，K值越大，亲和力越高，与抗原结合也越牢固。 2.亲合力：是指一个抗体分子与抗原分子表面数个相应抗原表位之间的结合强度。 亲合力与抗体结合价相关（多价优势） 三、亲水胶体转化为疏水胶体 血清学反应条件下，抗原抗体均带负电荷，使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体 当抗原与抗体结合后，表面电荷减少，水化层变薄；而且由于抗原抗体复合物形成后，与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏水胶