常见的分子生药学.ppt

分子生药学研究重点 药用植物的分子系统学研究 药用植物种质资源的分子生物学研究 生药的分子鉴定研究 道地药材形成的分子机理研究 珍稀濒危中药资源的遗传多样性分析和保护策略研究 药用植物的抗性基因工程研究 药用化学成分的生物转化及分子机理研究 药用植物有效成分生物合成分子机理与调控的研究和药用植物细胞 组织和转基因器官培养与活性成分生产等 分子生药学研究策略 分子生药学研究方法 DNA 分子遗传标记技术已有20多种，认为五大类比较合适进行研究。 DNA复制原理的具体应用— PCR技术 PCR产物的分子克隆 遗传标记 （Genetic marker) 遗传学中通常将可识别的等位基因称为遗传标记。 但随着遗传学和基因概念的发展其内涵也发展。除基因标记外遗传标记主要包括： 1.形 态 标记： 是指那些能够明确显示遗传多态的外  观性状，如株高、粒色等的相对差异 2.细胞学标记 ：是指能够明确显示遗传多态的细胞学特征。 如染色体结构上和数量上的遗传多态性等 DNA 分子鉴定前景广阔 鉴定近缘生药品种； 鉴定名贵易混淆生药； 鉴定动物类生药； 鉴定药材道地性； 鉴定生药野生与家种； 刻划生药质量标准化； 鉴定中药原粉制剂。 范例一 黄芪药材的植物来源复杂，《药典》收载2种植物—膜荚黄芪（A. membranaceus Fisch. Bge）和蒙古黄芪（A. membranaceus Fisch. Bge. Var. mongholicus）。此外还有地方不同属植物红芪。 由于市面上黄芪经过加工后，多种形态发生变化，而且近缘种形态特征相似，仅从形态学、化学成分鉴定，困难较大。 范例二 叶绿体matk基金石斛鉴定真伪品 兰科石斛属5种植物金钗石斛、铁皮石斛、束花石斛、粉花石斛、流苏石斛 资源短缺造成石斛属30余种植物和近缘属的多种植物充斥与药材市场，因此有必要利用分子标记技术对真伪品进行区分 方法特点 利用DNA测序技术，测定真伪品石斛matk基因核苷酸序列变化，通过核苷酸序列变化程度，利用进化分析软件，进行系统发育树构建，得出亲缘关系，从核酸水平揭示真伪品区别 范例三 野生与杂交天麻的DNA标记鉴定 天麻是《中国药典》收载名贵中药天麻的唯一入药品种，其块茎入药。天麻传统的原植物鉴定、性状鉴定、显微鉴定、理化鉴定等方法，均不能准确区分野生与杂交天麻，使天麻种质资源的鉴定、保护、开发和利用受到制约。 PCR原理 Southern blot 返回 1号样品为红芪 其他为药典收录蒙古黄芪、膜荚黄芪 RAPD isozyme 返回 RFLP 返回 返回 DNA样品限制酶 酶解 电泳 RAPD 返回 返回 AFLP 返回 * * 生药学这个学科的建立已经有近200年的历史，其间虽然也在不断的发展，然而对生药材鉴定技术而言，最初只是药材性状鉴别，也就是说药材的外部形态特征、色泽、断面、质地、气味等进行药材真伪鉴别，其后逐步发展为药材细胞组织形态特征为依据，其间还在真伪鉴别和质量研究中将理化方法引入，特别是以成分分析为依据，将各种光谱分析法应用得淋漓尽致，使生药学发展到一个新的高峰。 分子生药学 ——生物分析技术 在分子水平上研究生药的鉴定、生产和成分的一门科学，所依据的主要是生药学和分子生物学的理论和方法，是生药学的一个极富前瞻性和前景性的分支。 可以说，分子生药学不仅继承传统生药学的内容和使命，更将赋予生药学新的任务和挑战。 分子生药学 ——生物分析技术 中国中医研究院中药研究所所长—黄璐琦 生药学中的一个分支学科 中药高产、优质、多抗性品种的培育 濒危紧缺中药资源的保护和持续利用 中药新的、便捷、准确的分子标识鉴定方法的研究 从基因层次,为过去不能很好解决的问题如道地药材的研究、药材品质的定向调控等提供了新的方法和思路。 分子遗传标记技术 通过直接分析遗传物质的多态性来诊断生物内在基因排布规律及其外在性状表现规律的技术。任何生物种或个体都具有特定的DNA 多态性，通过直接诊断分析DNA 的多态性，便能避开遗传特性表现过程中的环境因素、数量性状遗传或部分与完全显性的干扰，快速准确地鉴定药材真伪。 1. 以Southern 杂交为基础的DNA分子标记技术 2. 以PCR为基础的分子标记技术 3. 以重复序列为基础的分子标记技术 4. DNA序列分析 DNA 分子遗传标记技术的优点 DNA 分子标记不受发育时期和环境的影响，DNA分子标记在基因水平进行标记，不受取材部位、时间和环境的影响，而形态标记和生化标记都是基因表达的结果，其结果受发育和环境的影响，测定有时会不准确； DNA 分子标记通常是共显性，表现的信息量大，可精