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早期宫颈癌淋巴结转移相关标记物的研究 　　【摘要】 目的：探讨早期宫颈癌淋巴结转移相关标记物。方法：选取近3年笔者所在医院诊断为早期宫颈癌的患者作为研究对象，患者入院后接受宫颈癌根治术及淋巴结清扫，术后将淋巴结制成病理标本。按是否发生肿瘤淋巴结转移分为两组，48例阳性组和165例阴性组。对两组CXCR4基因、CXCL12基因表达和VEGFR-3、VEGFR-C阳性率进行比较。结果：阳性组CXCR4基因、CXCL12基因表达水平显著高于阴性组，两组比较差异均有统计学意义（P0.05）。阳性组VEGFR-3、VEGFR-C阳性率显著高于阴性组，两组比较差异均有统计学意义（P0.05）。结论：本次研究认为CXCR4、CXCL12、VEGFR-3、VEGFR-C可作为判断宫颈癌发生转移的一个生物学指标。 　　【关键词】 宫颈癌； 淋巴结； 转移； 标记物 　　中图分类号 R711 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2015）12-0071-02 　　doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2015.12.035 　　宫颈癌的发病率和死亡率在近几年呈增高趋势，而且宫颈癌的年轻患者逐渐增加，宫颈癌发病呈现年轻化的趋势[1]。目前临床发现的宫颈癌患者多为晚期患者，宫颈癌严重地威胁妇女身体健康及社会经济的发展。有学者指出宫颈癌患者有无淋巴结转移是影响预后的重要因素，因此及时发现淋巴结转移对改善患者预后有积极作用[2]。一般肿瘤转移的途径为肿瘤细胞与基底膜附着，然后穿透入血管或淋巴管，形成转移灶。在此过程中，趋化因子及血管内皮生长因子发挥重要作用。肿瘤细胞依靠趋化因子与特异性受体结合，最终出现靶器官转移。血管内皮生长因子（VEGFR）可使局部淋巴管和毛细血管增生，促进恶性肿瘤生长和淋巴道转移。因此，笔者拟选择近3年笔者所在医院诊断为早期宫颈癌的患者作为研究对象，探讨早期宫颈癌淋巴结转移的相关标记物。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选择近3年笔者所在医院诊断为早期宫颈癌的患者作为研究对象，患者入院后接受宫颈癌根治术及淋巴结清扫，术后将淋巴结制成病理标本，按是否发生肿瘤淋巴结转移分为两组，48例阳性组和165例阴性组。入选标准：（1）患者年龄大于18周岁，首次诊断为宫颈癌，术前无放化疗及免疫治疗史。（2）肿瘤分期为ⅠA及ⅡA。排除指标：（1）入院时生命体征不平稳的患者。（2）入院有严重肝、肾功能不全，恶性肿瘤，自身免疫性疾病者。 　　1.2 主要仪器及试剂 　　1.2.1 仪器 生物组织自动脱水机、石蜡包埋机、切片机、电热恒温水浴锅、培养箱、光学显微镜。 　　1.2.2 抗体和试剂盒 CXCR4、CXCL12鼠抗单克隆IgG抗体、VEGFR-3、VEGFR-C鼠抗单克隆IgG抗体、免疫组化染色试剂盒。 　　1.3 评价方法 　　（1）阳性组和阴性组CXCR4基因、CXCL12基因表达。（2）阳性组和阴性组VEGFR-3、VEGFR-C阳性率。 　　1.3.1 CXCR4、CXCL12测定方法 将肿瘤切片组织放入甲醛磷酸缓冲液中固定36 h，乙醇常规脱水、透明使用二甲苯，石蜡浸蜡包埋，切片，HE染色。使用美国微生物公司提供的多克隆抗体进行检测。 　　1.3.2 VEGFR-3、VEGFR-C测定方法 VEGFR-3、VEGFR-C主要在细胞质或线粒体内表达，呈棕黄色颗粒状。分别用低倍和高倍镜观察切片，每张切片选取观察5个高倍镜视野（200X）进行着色癌细胞计数。主要依据显色肿瘤细胞百分率进行判断：切片中无显色癌细胞者为0分，显色癌细胞占癌细胞总数50%者为3分。将每张切片染色强度得分和染色细胞百分率得分各自相加得出的和为最后得分，3分记为阳性。 　　1.4 统计学处理 　　采用SPSS 13.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验，计数资料采用字2检验，P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 两组CXCR4基因、CXCL12基因表达 　　阳性组CXCR4基因、CXCL12基因表达水平显著高于阴性组，两组比较差异均有统计学意义（P0.05），详见表1。 　　3 讨论 　　本次研究发现阳性组和阴性组CXCR4基因、CXCL12基因表达水平比较差异均有统计学意义（P0.05）。CXCL12又称前B细胞刺激因子，属于趋化因子，参与细胞间的信息传递。最初有学者发现乳腺癌常见的转移部位如淋巴结、肺、肝脏高表达CXCL12，因此推论CXCL12与乳腺癌转移有密切关系[1]。而CXCL12在有转移的淋巴结中的表达量减少，可能与肿瘤细胞对CXCL12消耗增多，或肿瘤细胞与CXCR4受体结合，使CXCL12表达量减少有关。CX