二膦酸盐在防治人工关节松动中的作用及其分子机制-矫形外科学专业论文.docx

主要缩赂词 TRAP OLC PBMC UHMWPE MCSF OCIF ODF RANKL RANK ISH ELISA RTPCR tartrate -resistant acid phosphatase 抗酒石酸酸性磷酸酶 osteoclastlike cell 破骨样细胞 peripheral blood mononuclear cell 外周血单个核细胞 ultrahigh molecular weight polyethylene 超高分子量聚乙烯 macrophage-colony stimulate factor e噬细胞集落剌激因子 osteoclastogenesis inhibitory factor 破骨细胞生成抑制因子 。steoclast di的rent?ation factor 破骨细胞分化因子 ligand of receptor activator of NF斗C.B NF-kB受体激活物配体 recepωr activator ofNF-k.B NF去B 受体激活物 In Situ Hybridization 原位杂交 EnzymeLìnked Immunosorbnent Assay 酶联接免疫吸附测定 Reverse transcr?ption-polymerase chain reaction 逆转录聚合酶链式反应 、BLGmw创GWmMMatrix Metalloproteinase nuclear 、B L G mw 创 G W m M 咿mosteoprotegerin ligand 咿 m 基质金属蛋白酶 核因子 NF去B 护骨因子 护骨因子配位基 泾基磷灰石 中文摘要 二工酸盐在防治人工关节松动中的作用 及其分子机制 华中科挨大学问济医学院附属问济医院骨科 博士研究生 陈明 指导老师 夏千二云云教授 目的:分别从细胞水平、分子水平及动物实验来探索二瞬酸盐在防治人工关节松 动中的作用及作用机制。 方法: 1 细胞水平:收集小鼠骨髓绵腿子含有 10 gmol瓜的 1，25 二楼基维生素 。3口1 25- (OH)2D3]的 a-MEM 完全培养基中体外培养，诱导骨髓细胞生成破青 结施，设索不同浓度的阿伦磷酸锁给药草并于培养的第 6，91 12 天混察记录抗滔 石酸酸饺磷酸酶( tartrate..resistant acìd phosphatase，TRAP )阳性多核巨细胞[被管样 细胞 (osteoclast-like ceU，OLC 门生成数f 反校否应营短跑堂成情况。记数培养 12 天 骨胶片上骨吸收陷窝数及吸收面积，反映管吸收情况 4 2 分子水平:分离培养人外周血单个核细胞，分成 5 缀。 A 组z 对照、缀，仅 旦在核细胞。 B 组=关节腾腾怨，培养细胞中加入越高分子蠢的聚乙烯颗粒 (ultrahigh molecular weight polyethylene ，U召M\VPE)啻 C 级: B+IO飞lollL 的饲伦磷酸锅。。 怨: B+10-5 mol/L 的阿伦鳞酸锅。 E 短: B+l0心 mol/L 的两{仑磷酸锅。培养 24 小 时!I ELISA 法检测结胞之请中 IL..1?、IL-6 及 TNFα 含盏 p 提取各级绍JJé!总陀怡， 扇 RT-PCR 检测各级管吸收因子 IL冶及 TNF-a:基层的表达， Jj去位杂交方法检测 ILl?n议NA 的表达。 3 动物实验:建立人工关节松动的动物模恕，设立实验缓和对照绍，实验组 每日阿伦瞬酸锵灌霄，用药 8 周后?对照、组和实验组组织团片对比观察假体周臼 霄溶解情况n 检测两组关节囊上清液中江蛐峻的含量 a 结果: (1) 培养黎加入不向浓度的阿伦揭露酸销后，小鼠骨髓济与字号;二成的 TRAP 陆 2 性的细胞数减少，骨吸收陷窝数及面积均减少。 (2)关节磨屑组骨吸收因子及基 因的表达显著高于对照组 (pO.Ol )， 不同浓度的阿伦瞬酸锅组骨吸收因子及基 因的表达明显低于关节磨屑组( pO.01 ) 0 (3 )关节磨屑引起假体周围骨吸收， 使用阿伦瞬酸纳后，假体周围新生骨容积增加，骨溶解被抑制。实验组上清液中 江-l? 的含量比对照组低。 结论: 二腾酸盐可抑制骨髓细胞体外培养中破骨样细胞的形成，抑制破骨细胞骨 吸收作用:抑制关节磨屑诱导的骨吸收因子的表达;阻止关节假体周围骨溶解， 从而可有效防治关节磨屑诱导的人工关节松动 关键词:二瞬酸盐:关节磨屑: 骨吸收: 破骨细胞:骨髓细胞:人工关节: 动物实验 3 Effects of bisphosphonates in the prevention and treatment of aseptic loosenin