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第十六章 基因诊断Gene Diagnosis 基因诊断—以DNA或RNA为诊断材料，通过检查基因的存在、缺陷或表达异常，对人体状态和疾病作出诊断的方法和过程 第一节 基因诊断的技术方法 一、基因诊断中常用的分子生物学方法 ㈠ 核酸分子杂交 ㈡ PCR ㈢ SSCP（PCR-SSCP） ㈣ 限制酶酶谱分析 ㈤ DNA序列测定 ㈥ DNA芯片技术 ㈠ 核酸分子杂交 杂交双链的稳定程度主要由Tm值决定，影响Tm值的因素包括： 双链的碱基组成、长度、碱基错配程度 溶液离子强度 变性剂的影响 在无变性剂存在的情况下，最适杂交发生在比DNA/DNA Tm低20～25℃，比DNA/RNA Tm低10～15℃ ㈡ PCR 一般与其它技术合用 ㈢ 单链构象多态性（SSCP）检测 PCR- SSCP 由于检测点突变 ㈣ 限制酶酶谱分析 基因突变导致酶切位点的丢失或相对位置发生改变 ㈤ DNA序列测定 ㈥ DNA芯片技术 二、基因诊断的基本方法 基因变异致病的类型： 内源基因的变异 基因结构的突变 点突变、插入、缺失、重排、异位 基因表达异常 mRNA剪接异常 外源基因的插入 ㈠基因突变的诊断 点突变的诊断 ①诊断已知的点突变 （PCR/ASO） 一对探针 突变碱基置探针中央 控制杂交条件 结果分析： 反向杂交技术 基因芯片技术：可检测出新的突变类型