常见的结核感染T细胞斑点试验.ppt

感染二科 由来----γ干扰素释放试验（IGRAs） 在2001年前，美国仅批准结核菌素皮肤试验（TST）用于结核分支杆菌的检测。在认识到IFN-γ在调节对结核分支杆菌的细胞介导的免疫反应中起重要作用，从而使得（interferon gamma release assays）IGRAs用于检测结核感染。IGRAs通过检测代表结核分支杆菌的抗原刺激T淋巴细胞反应后释放IFN-γ的量来判断是否存在结核杆菌感染。 T-SPOT-TB—定义 以结核特异的混合抗原A和混合抗原B（分别为ESAT-6和CFP-10的部分多肽片断）刺激结核杆菌感染者外周血单核细胞中存在结核特异的活化T淋巴细胞分泌γ干扰素，从而应用ELISPOT方法检测对结核杆菌反应的效应T细胞数量，对结核杆菌感染进行辅助诊断。 特异抗原 ELISPOT T-SPOT-TB—几个概念 ELISPOT（enzyme-linked immunospot assay,）是一种新型的免疫酶技术，它是从单细胞水平检测分泌抗体细胞或分泌细胞因子细胞。（简单说：可以数出分泌特异因子的细胞的个数） ESAT-6和CFP-10蛋白：存在结核分枝杆菌及少数致病非结核分枝杆菌中名为“RD1”的基因序列，编码产生两种蛋白。在卡介苗菌株和大部分环境中的分枝杆菌基因中则缺乏次序列。 T-SPOT-TB—示意 T-SPOT-TB—解释 非黄金标准 定性检测而不是定量检测 敏感性95.3%-98.8% 特异性94.1%-100% 萨斯分枝杆菌( My cobacter ium kans asii ) 、海分枝杆菌(My cobacter ium mar inum ) 、斯氏分枝杆菌( My cobacter ium sz ul gai ) 等少数分枝杆菌中也存在完整RD1区，编码ESAT??6 和CFP??10, 可造成检测结果成假阳性。 T-SPOT-TB—应用 在活动性结核病中的诊断意义 1.敏感性86-94%，特异性89-99% 2.在肝移植术后、艾滋病、血液肿瘤等免疫抑制患者中， T-SPOT-TB阳性率略低于免疫正常组，但仍具有较高的敏感性，且优于结核菌素试验。 3.在肺外结核患者诊断中的，敏感性优于结核菌素试验。 4.对小于4岁儿童，与结核菌素实验比较敏感性无优势，美国CDC更推荐结核菌素实验。 T-SPOT-TB—应用 在结核性脑膜炎、结核性胸膜炎中的诊断意义 1.敏感性优于ADA、TB-DNA，约在62-75%，特异性无统计学差异。 在结核病治疗中的评价意义 1.其数值高低与严重程度无关。 2.效应T细胞随结核杆菌的清除而消失，其阴性及阳性结果可作为评估治疗效果的手段之一 。 T-SPOT-TB—应用 在潜伏性结核杆菌感染者的筛选中 1.敏感性优于结核菌素试验，且不受卡介苗接种影响。 2.较少受到其他分支杆菌感染影响。 3.其阴性预测值高于阳性预测值，排除诊断意义更高。 谢谢 * TST（TB-skin-test) QFT：结核杆菌纯化抗原（PPD）刺激---ELISA法检测，早期不能区分结核杆和非结核分枝杆菌，不能区分BCG接种。后发现ESAT-6和CFP-10两种结核分枝杆菌和部分致病非结核分枝杆菌特异蛋白，可区分BCG及大多数非结核分枝杆菌，并提高特异性、敏感性。 QFT-G、QFT-GIT增加空白对照。 * * * * * * * * * TST（TB-skin-test) QFT：结核杆菌纯化抗原（PPD）刺激---ELISA法检测，早期不能区分结核杆和非结核分枝杆菌，不能区分BCG接种。后发现ESAT-6和CFP-10两种结核分枝杆菌和部分致病非结核分枝杆菌特异蛋白，可区分BCG及大多数非结核分枝杆菌，并提高特异性、敏感性。 QFT-G、QFT-GIT增加空白对照。 * * * * * * * *