用麻疹活疫苗制备抗麻疹病毒单克隆抗体及其的应用.docVIP

用麻疹活疫苗制备抗麻疹病毒单克隆抗体及其的应用 　　文章编号：1004-9231(2008)08-0369-03 　　摘要：[目的] 制备抗麻疹病毒(MV)的单克隆抗体(单抗，McAb)，并用该单抗研制捕获法ELISA检测MV-IgM的诊断试剂盒。 [方法] 以MV减毒活疫苗免疫Balb/c小鼠，其脾细胞与SP2/0细胞融合，筛选分泌抗MV的杂交瘤细胞株，以获得该单抗，并对用其研制的检测抗MV-IgM试剂盒进行考核。 [结果] 获得的杂交瘤细胞株中，B2能稳定分泌高滴度抗MV单抗。经考核，用该单抗酶结合物研制的检测抗麻疹-IgM试剂盒特异性和稳定性良好，与同类商品试剂盒比较，其检出麻疹病例血清抗MV-IgM的时间较早。 [结论] 应用麻疹减毒活疫苗成功地制备了小鼠杂交瘤细胞，其中B2株能稳定分泌高效的抗MV 单抗，用于研制检测抗MV-IgM捕获法ELISA试剂盒，其敏感性、特异性和稳定性令人满意。 　　关键词：麻疹病毒；单克隆抗体；抗麻疹病毒-IgM；酶联免疫吸附试验 　　中图分类号：R 511.1 文献标识码：A 　　 　　Preparation and usage of the monoclonal antibody from living attenuated measles virus vaccine ZHU Li-hua，CHEN Juan-juan，ZHOU Zhi-tong，et al (Shanghai Public Health Centre Affiliated to Fudan University，Shanghai 201508，China) 　　Abstract：[Objective] To develop the monoclonal antibody (McAb) against measles virus(MV) and use it to prepare capture ELISA anti?MV specific IgM kit. [Methods] Balb/c mice were immunized with MV attenuated vaccines and their spleen cells were fused with SP2/0 cells. From these mice，the McAb against MV was obtained and used to prepare capture ELISA anti MV specific IgM kit. [Results] B2 strain hybridoma cells could secret McAb against MV in high titer specifically. McAb was used to preparate capture ELISA anti MV specific IgM kit. The specificity and stability of this kit were good. Anti MV-IgM in sera in cases with measles could be detected by this kit earlier than that by a same type commercial kit. [Conclusion] The sensitivity，specificity and stability of the capture ELISA anti?MV specific IgM kit prepared using the McAb are satisfactory。 　　Key words：Measles virus；Monoclonal antibody；Anti MV specific IgM；ELISA 　　 　　麻疹是一种高度传染的呼吸道病毒感染，具有典型的临床症状，包括斑丘疹、发热、咳嗽、鼻炎和结膜炎。最近数十年来，全球普遍使用了麻疹疫苗，麻疹的患病数和死亡数大幅度下降，但此病的流行仍有发生。世界卫生组织 (WHO) 估计，2000年麻疹病例≥ 3000万，造成77.7万?例死亡[1]。虽然1999―2003年间麻疹相关的死亡数从87.3万例降至53万例，但麻疹病毒仍是发展中国家儿童的发病和死亡的主要原因之一[2]。麻疹病毒(MV)感染的实验室诊断“金标准”是检测到麻疹特异性IgM [3]，可采用捕获法ELISA或是免疫荧光法检测，在1个月内未接种过麻疹减毒活疫苗而在血清中查到麻疹IgM抗体作为麻疹实验室诊断标准之一 [4]。WHO推荐采集临床可疑麻疹病例血清标本检测IgM 和尿液标本、鼻咽标本检测麻疹病毒基因组[5