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天麻多糖的研究概况..doc
天麻多糖的研究概况
】综述了天麻多糖的研究近况,主要包括其化 学组成、含量测定和药理活性等3个方面,为进一步开发利 用天麻多糖提供一定的参考。
关键词】天麻多糖化学组成含量测定药理活性 天麻为兰科真菌营养型多年生草本植物,药用其干燥块 茎,是我国传统名贵中草药之一[1-2]。天麻具有平肝熄风止 痉之功效,主要用于治疗头痛眩晕、肢体麻木、小儿惊风、 癫痫抽搐、破伤风[3]。天麻中含有天麻素、赤箭苷、胡萝 卜苷、天麻多糖、腺嘌呤、腺嘌呤核苷、多种氨基酸等活性 成分[4]。现代药理研究表明,天麻还具有增智健脑、清除自 由基、延缓衰老的作用,对老年性痴呆有一定的疗效[5]。早 期对天麻的研究主要集中在天麻素和天麻苷元等方面。植物 多糖类化合物是一种免疫调节剂,它能激活免疫细胞,提高 机体的免疫功能,而对正常细胞没有毒副作用,临床上多用 于治疗艾滋病和抗肿瘤、抗衰老等[6]。许多研究工 都 从天麻中分离得到了多糖,并对其药理活性进行了一系列研 究,本文就此加以概述。
1天麻多糖的提取
通常天麻多糖的提取采用水煮醇沉的常规方法,一般先 用石油醚脱脂,再经热水提取乙醇沉淀得多糖。多糖加水复 溶,透析去除小分子化合物,再去蛋白、醇沉可得粗多糖。
朱晓霞等[7 ]确定了此法的最佳工艺条件为物料比1 :40, 浸提温度120°C,浸提时间3 h,此工艺条件下,天麻多糖提取 率为%。张梦娟等[8]采取超声波提取法从天麻中提取天麻多 糖,实验结果表明,使用超声波提取法可使天麻多糖提取率 得到较大提高,其最佳提取工艺条件为:提取温度66°C,提 取时间34min,料水比1 : 45,在此工艺条件下,天麻多糖提 取率为%。
2天麻多糖的分析 天麻多糖的含量测定
目前天麻多糖的含量一般采用硫酸一蒽酮法或改良的 苯酚一硫酸法[9]来测定。
纯度检测
天麻多糖纯度可用聚丙烯酰胺凝胶电泳、醋酸纤维薄膜 电泳和凝胶色谱法检测。聚丙烯酰胺凝胶电泳所用缓冲液为 的硼砂液,染色剂是高碘酸一希夫试剂;醋酸纤维薄膜电泳 所用缓冲液为的硼砂液,甲苯胺蓝染色。凝胶色谱法所用凝 胶为 SephadexG-150 和 DEAESephadex A50,mol/LNaCl 洗脱, 蒽酮一硫酸法检测。多糖经两种电泳均为单一色带,经凝胶 色谱柱层析,流出液均为单峰,再用考马斯亮蓝G-250染色 法检测蛋白质含量,即可说明它们均为单一组分[10]。
天麻多糖的化学组成分析
张梦娟[11]和孙亚男[12]采用离子色谱法分别研究了
西产天麻和云产天麻中天麻多糖的单糖组成。前者从粗多糖 中分离纯化得到了 2个级分GeB40-l和GeB80-4,其单糖组 成分别是:GeB40-l由L-鼠李糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D- 木糖和D-甘露糖5种单糖组成,摩尔数之比L-鼠李糖:D- 半乳糖:D-葡萄糖:D-木糖:D -甘露糖=29 : 1 : 42 : 11 :
2; GeB80-4由L-鼠李糖、D-半乳糖和D-葡萄糖3种单糖组 成,3种单糖摩尔数之比L-鼠李糖:D-半乳糖:D-葡萄糖=: 1 : 25。后者则得到1个级分的纯品,即WPGB-A-H,其组成 为D-葡萄糖、D-甘露糖2种单糖。
有学者研究报道[13]从天麻中分离出3种杂多糖:GE-I, GE-II, GE-III,均为白色粉末,元素分析不含氮,经纸上 电泳和凝胶柱层析,证明为单一组分。3种杂多糖经水解和 纸色谱分析主要为葡萄糖组成,制备乙酰衍生物进行气相与 已知单糖乙酰物比较和计算,结果得出3种多糖的组成及各 分子比。G E-I组成为葡萄糖:甘露糖:木糖:阿拉伯糖= 70 : 1 : :; GE-II组成为葡萄糖:甘露糖=19 : 1; GE-I II 组成为葡萄糖及微量甘露糖。
综上所述,从化学组成来看,天麻多糖的单糖主要由戊 糖和己糖构成。如戊糖中的木糖,己糖中的葡萄糖、半乳糖、 鼠李糖等。此外还有一些单糖衍生物如甘露糖等,这都为以 后确定天麻多糖的结构奠定了良好的基础。
天麻多糖的理化性质分析
糖在浓硫酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物,后者与 a -萘酚作用形成紫红色复合物,在糖液和浓硫酸的液面间 形成紫环;与蒽酮作用生成蓝绿色复合物;与苯酚作用生成 黄棕色复合物,作为糖的定性鉴定[14]。Benedict试剂为含 C u2+的碱性溶液,能使还原糖氧化成酸类化合物,而其自身 被还原成红色或黄色的氧化亚铜。其碱性较Fehling试剂弱, 灵敏度高,干扰因素少[15]。
刘玉潭等[6]提取的纯化天麻多糖为白色粉末状固体, 溶于水,不溶于高浓度的甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯等有 机溶剂。天麻多糖水溶液呈透明黏稠状,pH弱酸性,与苯酚一 硫酸液反应呈黄棕色,与蒽酮一硫酸液反应呈蓝绿色,Moli sh反应呈阳性,与破…破化钟反应为阴性,
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